综述：胆囊癌新一代模型：从生物学洞见到精准医学

这篇综述系统梳理了胆囊癌（GBC）研究模型的演进，重点评述了从传统2D培养到3D类器官（organoids）、微流控（microfluidic）等前沿技术的突破，强调整合免疫组分的患者来源类器官（PDO）模型在精准肿瘤学中的转化潜力，为攻克这一高侵袭性胆道恶性肿瘤提供了新思路。

　　

Abstract

胆囊癌（GBC）作为胆道系统最具侵袭性的恶性肿瘤之一，其研究长期受限于传统模型的生物学还原度不足。近年来，3D类器官、微流控芯片和气液界面培养等创新平台，通过模拟肿瘤-基质互作、血管生成和转移过程，显著提升了疾病建模的精准度。尤其值得注意的是，整合T细胞等免疫组分的患者来源类器官（immune-PDO）系统，能够动态再现肿瘤免疫微环境（TIME），为个性化药物筛选提供了革命性工具。

Introduction

胆囊这个隐藏在肝脏下方的梨形器官，虽非生命必需，却是癌症的"隐形杀手"。全球每年约15万人死于GBC，其中95%为具有胆管细胞分化的腺癌。慢性炎症如同"导火索"，在胆结石、肝吸虫感染等因素作用下，通过表观遗传调控（如miR-130b过表达）驱动恶性转化。地理分布差异尤为惊人：智利发病率是北欧的25倍，提示环境与遗传的复杂博弈。

2D Culture Models

G-415细胞系作为首个建立的人源GBC模型，其E-cadherin表达特征犹如"分子胶水"，能自发形成囊状3D结构。通过CRISPR-Cas9基因编辑，研究人员在该模型中发现IL-6/JAK/STAT3通路如同"信号放大器"，促进肿瘤干细胞（CSCs）的干性维持。但传统2D培养的局限性在于：无法模拟细胞外基质（ECM）中层粘连蛋白（laminin-5γ2）的空间梯度分布。

3D Culture Models

在基质胶（Matrigel）中培养的GBC类器官，其形态学特征宛如"微型肿瘤"，保留原发灶的组织架构和分子标记（如CA19-9分泌）。特别有趣的是，采用气液界面（ALI）培养法时，肿瘤细胞会像"攀岩者"般沿胶原支架形成侵袭性突起，这与临床转移灶的Ki-67指数高度吻合。近期突破在于：将患者来源的癌症相关成纤维细胞（CAFs）与类器官共培养，成功再现了Wnt/β-catenin通路介导的化疗耐药表型。

Conclusion

3D生物打印技术正在书写GBC研究的新篇章——通过精确排布肿瘤细胞、内皮细胞和巨噬细胞，构建出具有脉管网络的"活体芯片"。这种仿生模型不仅能模拟吉西他滨（gemcitabine）的渗透动力学，还可评估PD-1抑制剂引发的"免疫风暴"。未来挑战在于建立标准化培养体系，以及解决类器官培养周期（目前约4-6周）与临床决策时间窗的匹配问题。

Ethical Approval

本研究经印度医学研究理事会（ICMR）伦理委员会批准（编号I-1290），所有实验遵循《赫尔辛基宣言》准则。作者声明无利益冲突，原始数据可通过通讯作者合理获取。