胰腺癌细胞通过非信号肽依赖性途径分泌角蛋白19（KRT19）介导免疫逃逸的机制研究

本研究揭示了胰腺导管腺癌（PDA）免疫逃逸的新机制：癌细胞通过非经典分泌途径（包括内质网依赖性和分泌性自噬）外排角蛋白19（KRT19），捕获CAF来源的CXCL12，形成CXCL12-KRT19复合物以排斥T细胞。创新性发现KRT19通过其头部结构域进入内质网（ER），并与信号识别颗粒（SRP）、Sec61转位子互作，为靶向肿瘤免疫微环境提供新策略。

　　

研究背景

胰腺导管腺癌（PDA）对免疫治疗耐药的核心机制是T细胞被排除于肿瘤巢外。既往研究发现，癌细胞通过表面角蛋白19（KRT19）捕获癌症相关成纤维细胞（CAF）分泌的CXCL12，后者与T细胞表面的CXCR4结合，形成免疫抑制性屏障。然而，KRT19作为胞质中间丝蛋白，缺乏内质网（ER）导向的信号肽（SP），其分泌机制长期未明。

研究方法与发现

KRT19在PDA细胞膜及内质网的定位

通过细胞表面生物素化实验和共聚焦显微镜，证实KRT19与KRT8在PDA细胞表面形成类中间丝网络。利用ER限制性TurboID系统和分裂GFP报告实验，首次发现KRT19通过其头部结构域进入ER，而KRT8则通过分泌性自噬外排。

分泌途径的分子机制

• ER-Golgi通路依赖：布雷菲德菌素A（BFA）和高尔基体抑制剂GCA显著抑制KRT19分泌，且KRT19与SRP68/SRP19及Sec61β互作，表明其通过经典分泌机器转运。
• 分泌性自噬途径：诱导表达自噬抑制因子mSt-ATG4B^C74A或敲低Beclin1后，KRT19和KRT8的表面定位减少，提示二者通过自噬小体共分泌。

体内验证

在小鼠皮下移植瘤模型中，Sec61-TurboID标记的KRT19被生物素化，证实其在体内进入ER的路径。

研究意义

1. 机制创新：阐明KRT19通过头部结构域模拟SP功能进入ER的独特机制，突破传统分泌蛋白认知。
2. 治疗靶点：靶向KRT19-CXCL12轴或联合阻断自噬通路，可能逆转PDA的T细胞排斥。
3. 生理关联：正常结肠上皮中CXCL12与角蛋白共定位，提示该通路或参与黏膜免疫稳态。

图表亮点

• 图1：ER-TurboID标记的KRT19生物素化及与KRT8的差异定位。
• 图3：ELISpot证实BFA和GCA抑制KRT19分泌。
• 图6：自噬抑制减少KRT8/KRT19表面表达。

（注：全文数据均来自原文实验，未添加主观推测。）