DLL3作为神经内分泌宫颈癌恶性进展与免疫抑制的关键枢纽：基于类器官-TILs共培养系统的治疗验证

针对神经内分泌宫颈癌(NECC)恶性机制不明和治疗困境，研究人员通过单细胞测序(scRNA-seq)发现表达SYN/INSM1的神经祖细胞(NPCs)是恶性起源，揭示DLL3通过NOTCH通路同时驱动肿瘤进展和免疫抑制。创新性建立NECC类器官-TILs共培养系统验证AMG757靶向治疗可协同化疗(EP)激活T细胞，为NECC精准治疗提供新策略。

　　

神经内分泌宫颈癌(NECC)是宫颈癌中罕见的"四无"亚型：起源不明(Uncertain origin)、侵袭性强(Ultra-aggressive)、疗效差(Unsatisfactory treatment)、缺乏模型(Unavailable models)。尽管HPV疫苗普及，NECC仍占宫颈癌1.5%且5年生存率不足40%，现有治疗方案多借鉴鳞癌/腺癌经验，缺乏针对性。更棘手的是，其独特的肿瘤免疫微环境(TIME)特征和致癌驱动因素长期未被阐明，严重制约精准治疗发展。

复旦大学附属妇产科医院团队在《Genes》发表的研究，通过单细胞RNA测序(scRNA-seq)结合T细胞受体测序(TCR-seq)分析6例患者样本(2例NECC/2例ADC/2例SCC)，创新建立NECC类器官-TILs共培养系统，采用多色免疫组化(mIHC)、流式细胞术等功能实验验证发现。关键技术包括：单细胞转录组分析鉴定恶性细胞亚群、细胞通讯网络构建、类器官培养与TILs共培养、AMG757靶向治疗评估等。

研究首先揭示表达SYN/INSM1的神经祖细胞(NPCs)是NECC恶性起源，其拷贝数变异(CNV)评分显著高于腺/鳞癌的恶性上皮细胞。通过拟时序分析发现NPCs存在三种功能状态：早期分化(edNPCs)通过ENTPD2/IFITM3重塑TIME、过渡期(tdNPCs)通过FAM162A/PFKFB3重编程代谢、晚期(ldNPCs)通过CDKN3/MKI67过度激活细胞周期，为分层治疗提供依据。

TIME分析显示NECC富含幼稚T细胞和耗竭T细胞(Tex)，且Tex高表达HAVCR2/CTLA4/LAG3等免疫检查点，但过半为可逆性Tex(CD38^lowCD101^low)，提示免疫治疗潜力。B细胞分析发现浆细胞通过CD38-PECAM1互作促进免疫抑制，颠覆其促抗肿瘤的传统认知。

关键突破在于发现DLL3的双重作用：通过DLL3-NOTCH2驱动NPCs恶性进展，经DLL3-NOTCH1/2诱导T细胞耗竭。mIHC证实DLL3特异性高表达于NECC。功能实验显示，HeLa细胞DLL3过表达(OE)增强增殖并抑制T细胞功能，而NCI-H82细胞DLL3敲除(KD)则逆转此效应。

最具创新的是建立NECC类器官-TILs共培养系统，证明AMG757(DLL3双特异性T细胞衔接剂)联合化疗(EP)可显著促进T细胞聚集、激活(CD137⁺CD107a⁺)和肿瘤溶解。该研究不仅解析了NECC独特发病机制，更通过类器官模型验证了靶向DLL3的临床转化价值，为这种难治肿瘤提供了精准治疗新范式。

研究意义在于：首次系统描绘NECC单细胞图谱，确立NPCs恶性起源；阐明DLL3作为"双效靶点"的分子机制；创建类器官-TILs共培养平台填补实验模型空白；临床转化方面，AMG757已在小细胞肺癌I期试验显示安全性，本研究为其拓展至NECC提供理论依据。局限性包括样本量小、缺乏体内实验等，未来需扩大验证。这项研究为攻克NECC的"四无"困境迈出关键一步。