综述：利用脂质体进行先进基因治疗的综合评述

这篇综述系统阐述了脂质体(Liposomes)作为非病毒载体在基因治疗中的前沿进展，重点分析了其组成(如DOTMA/DOTAP等阳离子脂质)、制备方法(反向蒸发法等)及递送机制(如内体逃逸技术)，探讨了在囊性纤维化(CF)、癌症等疾病中的应用挑战(如免疫清除、靶向性)，并展望了AI驱动脂质设计和混合递送系统的未来方向。

　　

脂质体：基因治疗的革命性载体

Abstract
基因治疗通过引入功能基因纠正遗传缺陷，而脂质体作为人工脂质囊泡，因其生物相容性、多功能性和封装能力成为理想载体。本综述深入探讨了脂质体基因治疗的组成、作用机制与应用，同时分析了当前挑战与改进策略。

Introduction
基因治疗技术通过替换缺陷基因治疗遗传疾病，如血友病、肌营养不良等。美国FDA将基因治疗产品定义为利用病毒或核酸改变细胞功能的生物制剂，分为体细胞治疗和生殖细胞治疗两类。

Novelty of This Review
区别于既往研究，本综述首次系统评估了刺激响应型脂质体的临床转化障碍，对比了关键脂质配方（如MC3、OF-02等），并整合了从体外研究到临床试验的全周期数据，特别关注了AI脂质设计和混合病毒/非病毒系统的发展趋势。

Liposomes
脂质体是由磷脂双分子层构成的纳米级药物载体，1960年代由Bingham发现。其结构特点（50-500nm直径、单/多层膜）和理化性质（如胆固醇调节膜流动性）直接影响药物包封率和体内行为。

Advantages
• 被动靶向肿瘤组织
• 高治疗指数和稳定性
• 降低药物毒性
• 延长血液循环时间
• 可结合靶向配体

Classification of Liposomes
按结构分为多囊泡(MVV)、多层(MLV)、小单层(SUV)和大单层(LUV)脂质体。小于200nm的脂质体具有更优的肿瘤蓄积能力。

Composition and Types of Lipids
磷脂（PC/PE/PS）构成基本骨架，胆固醇增强膜稳定性，PEG化脂质（如DSPE-PEG₂₀₀₀）延长循环时间。阳离子脂质（DOTMA/DOTAP）通过静电作用结合核酸，而DOPE等中性脂质促进膜融合。

Methods of Liposome Preparation
• 脂质膜法：经典方法，通过水合作用形成囊泡
• 冷冻干燥法(FDEL)：提高包封率
• 反向蒸发法：适用于基因材料封装
• 冷冻电镜技术：精确表征纳米结构

Barriers to Liposomal Gene Delivery
包括物理屏障（如胃肠道酸性环境）、生物屏障（如角膜上皮孔隙限制）和免疫屏障（如单核吞噬系统清除）。经鼻给药可绕过血脑屏障，而透皮给药需克服角质层阻力。

Mechanism of Liposomes in Gene Delivery
脂质体通过内吞作用进入细胞，借助质子海绵效应或膜融合实现内体逃逸。新兴的触发式内体逃逸技术(TEE)结合了脂质体与聚合物的优势，显著提升核酸胞质释放效率。

Applications
在黑色素瘤（Allovectin-7）、实体瘤（SGT-53）等临床试验中，脂质体展现出差异化疗效。病毒载体（如腺病毒）与脂质体的杂交系统成为研究热点。

Future Perspectives
AI辅助的脂质设计将加速新型载体开发，但规模化生产和伦理问题（如生殖细胞编辑）仍需突破。国际协调的监管框架是临床转化的关键。

Conclusion
脂质体基因治疗在靶向性、安全性方面具有独特优势，通过优化脂质组成和递送策略，有望为遗传病和复杂疾病提供突破性治疗方案。