LeLISA技术：基于凝集素的免疫分析法在胰腺囊性肿瘤黏蛋白与浆液成分鉴别中的创新应用

为解决胰腺囊性肿瘤(PCN)良恶性鉴别难题，挪威奥斯陆大学医院团队开发了新型凝集素-酶联免疫吸附试验(LeLISA)，通过8种凝集素检测囊液中黏蛋白-钙卫蛋白(Muc/Cp)复合物。研究发现黏蛋白囊肿与浆液性囊肿的光密度值存在显著差异(p<0.0001)，尤其Galanthus nivalis凝集素显示最佳区分效能，为无创诊断提供了新思路。

　　

胰腺囊性病变的鉴别诊断一直是临床难题。随着CT和MRI的广泛应用，胰腺囊性肿瘤(PCN)检出率显著上升，但如何区分具有恶性潜能的黏液性囊肿（如IPMN、MCN）与良性浆液性囊肿(SCN)或假性囊肿，直接影响着治疗决策。现行欧洲指南推荐结合影像学、囊液生化分析和分子检测，但CEA、KRAS突变等标志物的诊断效能有限。

奥斯陆大学医院领衔的国际团队在《Digestive Diseases and Sciences》发表创新研究，开发了凝集素替代抗体的新型检测技术LeLISA。该技术利用凝集素(Le)与糖蛋白的特异性结合特性，通过检测囊液中黏蛋白-钙卫蛋白(calprotectin, Cp)复合物，实现了胰腺囊肿成分的精准区分。研究纳入了30例经EUS-FNA获取的囊液样本（黏液性、浆液性、假性囊肿各10例），采用8种凝集素（如Galanthus nivalis、Agaricus blazei Murill等）包被微孔板，以HRP标记的抗Cp单克隆抗体混合物(MiMo)进行检测。

关键技术包括：1) 凝集素微孔板包被技术；2) 多克隆抗体混合物(MiMo)检测策略；3) 胰腺囊液样本队列（来自2008-2013年生物样本库）；4) 光学密度(OD)定量分析。

结果
LeLISA反应模式
黏液性囊肿囊液对全部8种凝集素均显示强结合（OD>0.2），其中Galanthus nivalis（结合甘露糖残基）和Agaricus blazei Murill（结合β-聚糖）反应最强。浆液性囊肿OD值普遍低于0.1，与黏液性囊肿差异极显著(p<0.0001)。

诊断效能验证
Galanthus lectin检测显示三类囊肿明显区分：浆液性囊肿OD值集中分布于0.05-0.1区间，而黏液性囊肿OD值分散在0.2-1.5范围，假性囊肿介于两者之间但存在重叠。

Cp生物学新发现
研究揭示了Cp通过S100A8/A9亚基与肿瘤细胞表面聚糖结合的新机制，这种相互作用可能影响肿瘤识别、转移等过程。

讨论与意义
该研究首次证实LeLISA技术在胰腺囊肿鉴别中的价值：

1. 诊断突破：浆液性囊肿的阴性预测值达100%，为避免不必要手术提供依据
2. 机制创新：阐明Cp-黏蛋白复合物通过糖基化修饰与凝集素结合的分子机制
3. 技术优势：相比传统ELISA，采用凝集素捕获策略可检测更广泛的糖基化变异
4. 临床转化：冷冻十余年的样本仍保持稳定性，提示该方法适合临床推广

局限性在于样本量较小且部分病例缺乏病理金标准。未来研究可拓展至其他含黏液病变（如结直肠癌）的检测。正如通讯作者Magne K. Fagerhol强调，这种"用糖生物学解码疾病"的策略，为肿瘤微环境研究开辟了新视角。