高效液相色谱-示差折光检测法(HPLC-RID)在葡萄糖-盐复合药物中葡萄糖杂质分析的创新方法开发与验证研究

本研究针对葡萄糖-盐复合药物中葡萄糖杂质因盐分干扰难以准确检测的行业难题，开发了基于乙醇预纯化的HPLC-RID新方法。通过优化溶剂体系与纯化流程，成功实现了葡萄糖及其杂质（A/B/C/D）的高精度测定，填补了药典空白，为复杂基质药物质量控制提供了可靠方案。

　　

在医药健康领域，葡萄糖-盐复合药物作为补充体液和电解质的重要制剂，其质量安全直接关乎患者健康。然而这类产品中葡萄糖杂质的检测却长期面临技术瓶颈——盐分（如NaCl、KCl）与目标杂质在传统高效液相色谱-示差折光检测器（HPLC-RID）分析中会出现峰重叠，而现行药典（BP/EP/USP）仅收录了葡萄糖原料药标准，对复合制剂中的杂质检测束手无策。更棘手的是，现有分析方法或需复杂衍生化（如GC），或受限于检测器特性（如UV对碳水化合物不敏感），甚至梯度洗脱在RID系统中的不可行性进一步加剧了分析难度。

为解决这一行业痛点，World Medicine ?la? San. ve Tic. A.?的研究团队在《Journal of Chromatography B》发表创新成果。研究人员首先通过乙醇预纯化策略有效消除盐干扰，随后建立基于Aminex HPX-87C色谱柱的HPLC-RID方法，在65°C柱温下以0.3 mL/min纯水流动相实现葡萄糖与四种关键杂质（A:麦芽糖、B:异麦芽糖、C:麦芽三糖、D:果糖）的基线分离。方法验证显示回收率达98.2%-101.8%，RSD<2%，灵敏度满足痕量检测需求。

关键技术方面，研究团队采用三阶段策略：1）通过溶剂极性筛选建立乙醇沉淀法去除盐分；2）优化等度洗脱条件克服RID系统限制；3）结合阳性极化检测提升信噪比。样本来自含氯化钠、枸橼酸钠、氯化钾的腹泻治疗用复方散剂。

【材料与仪器】章节显示，团队选用药典级对照品（EP葡萄糖单水合物、USP麦芽三糖等）和Waters/Alliance HPLC系统，检测器极化设置为阳性模式以增强响应。

【预纯化】部分揭示关键发现：未经处理的样品在10-20分钟保留区间出现严重共洗脱峰，而乙醇处理后可消除>99%盐分干扰，色谱图显示杂质A（t_R≈12.3min）与C（t_R≈18.7min）实现完全分离。

【结论】指出该方法成功解决三大难题：1）突破盐基质干扰的技术壁垒；2）建立符合绿色化学原则的简易前处理流程；3）首次实现复方制剂中葡萄糖杂质的准确定量。Harun Ergen等作者强调，该成果不仅为药企QC提供标准化方案，其"乙醇沉淀-RID检测"联用策略更为复杂基质药物分析开辟新思路。

讨论部分深入剖析了方法优势：相比HPAEC-PAD（易导致糖类差向异构化）和HPLC-ELSD（非线性响应问题），本方法兼具经济性与可靠性；相较于药典原料药方法，首次实现终产品杂质监控。研究团队特别指出，该方法符合ICH Q2指导原则，且避免使用乙腈等危险溶剂，在保证数据准确性的同时兼顾操作安全与环境友好性。这些突破性进展为全球药监部门完善复方制剂质量标准提供了重要技术参考。