MPO基因c.2031-2A>C变异与髓系肿瘤易感性的功能与临床关联研究

本研究针对MPO基因c.2031-2A>C变异在髓系肿瘤中的致病性争议，通过295例血液病队列分析及功能实验，证实该变异导致MPO蛋白表达缺失（PVS1），但其人群频率（0.006787）未显著高于健康对照（gnomAD数据），符合ACMG的VUS分类。首次报道该变异与RUNX1/RTEL1致病突变共存现象，为髓系肿瘤多基因协同致病机制提供新线索。

　　

髓过氧化物酶（MPO）作为先天免疫的关键酶，其遗传缺陷（MPOD）长期被认为仅与感染风险相关。然而近年研究发现，MPO基因变异可能与髓系肿瘤发生相关，尤其是内含子区c.2031-2A>C剪接位点变异在肿瘤队列中高频出现，但其致病机制与临床意义存在重大争议——ACMG指南中该变异因功能缺失效应（PVS1）与较高人群频率（BS2）的矛盾被归类为"意义未明变异（VUS）"，而ClinVar数据库更因单一"不确定意义"记录将其降级为"冲突分类"。

为解决这一争议，意大利佩鲁贾大学血液学研究中心团队开展了一项多维度研究。通过对223例髓系肿瘤（含AML、MDS、CMML等）的靶向测序（CHHD_A_v2 panel），发现6例（2.7%）携带MPO变异，其中50%为c.2031-2A>C。功能实验首次证实该变异导致：①MPO蛋白浓度显著降低（ELISA验证）；②异常转录本产生（109bp插入引发移码）；③野生型等位基因主导表达（qRT-PCR探针11-12/8-9比值分析）。但关键矛盾在于，该变异在欧洲非芬兰人群的频率（0.006787）与gnomAD健康对照无统计学差异。

研究亮点在于发现两例特殊病例：AML患者UPN1242同时携带RUNX1截短突变（L201Tfs*33）和MPO变异，提示多基因协同致病可能；另一例MDS患者UPN583存在RTEL1（R957W）与MPO变异共存。这些发现为理解髓系肿瘤的"二次打击"模型提供了新视角。

技术方法上，研究采用：①靶向NGS检测MPO外显子区；②Sanger测序验证变异；③ELISA定量MPO蛋白；④等位基因特异性qRT-PCR分析转录本；⑤基于ACMG/ClinVar标准进行变异分类。

主要结果包括：

1. 变异谱特征：c.2031-2A>C占MPO变异的50%，另发现致病性c.1555_1568del移码突变和良性c.752T>C错义变异。
2. 功能验证：c.2031-2A>C导致剪接异常（109bp插入）和蛋白截短，但残留野生型等位基因表达。
3. 临床关联：未发现MPO变异单独致病的明确证据，但与RUNX1/RTEL1突变共存可能增加风险。

结论部分强调：尽管c.2031-2A>C在功能上符合致病标准，其人群分布特征不支持作为独立致病因素。研究创新性提出MPO变异可能作为"修饰基因"与其他驱动突变协同促进肿瘤发生，这一发现对完善ACMG分类体系中的"基因-疾病特异性"评估标准具有启示意义。论文发表于《Annals of Hematology》，为髓系肿瘤遗传咨询提供了重要数据。