猫瘟病毒与犬瘟热病毒N蛋白抗体交叉反应性研究：日本猫血浆样本的免疫学分析

本研究针对猫瘟病毒(FeMV)与犬瘟热病毒(CDV)核衣壳(N)蛋白的抗体交叉反应性问题，通过构建重组N蛋白ELISA检测体系，分析100份日本猫血浆样本。研究发现6份CDV抗体阳性样本均与FeMV N蛋白发生交叉反应，RT-qPCR未检出CDV基因组RNA，证实FeMV抗体检测存在假阳性风险。该成果为改进FeMV免疫学检测方法提供重要依据，发表于《Journal of Virological Methods》。

　　

近年来，猫瘟病毒(FeMV)作为一种新发现的副黏病毒科病原体，与猫慢性肾病(CKD)的关联性引发广泛关注。这种病毒不仅在家猫中流行，还在黑豹、负鼠等野生动物中引发严重肾炎。然而在研究过程中，科学家们发现一个令人困惑的现象：使用FeMV核衣壳(N)蛋白进行抗体检测时，可能出现与犬瘟热病毒(CDV)的交叉反应。这种免疫学干扰究竟是否真实存在于自然感染的猫体内？这个问题直接关系到FeMV流行病学数据的准确性，也影响着临床诊断的可靠性。

东京农业大学的研究团队在《Journal of Virological Methods》发表的研究，为解答这一关键问题提供了实验证据。研究人员首先在大肠杆菌中表达并纯化了谷胱甘肽S转移酶(GST)融合的FeMV和CDV N蛋白，分别建立ELISA检测体系。通过对日本兽医诊所收集的100份猫血浆样本进行筛查，发现20份样本呈FeMV抗体阳性，其中6份同时与CDV N蛋白发生交叉反应。值得注意的是，这6份"双阳性"样本经高灵敏度RT-qPCR检测（检测限100拷贝）均未检出CDV基因组RNA，Western blotting进一步证实这些抗体确实能与目标病毒抗原特异性结合。

关键技术方法包括：1）原核表达系统制备GST融合N蛋白；2）建立双病毒N蛋白ELISA检测平台；3）采用RT-qPCR排除CDV感染可能性；4）Western blotting验证抗体特异性。样本来源于日本动物收容所和兽医诊所提供的100份猫血浆。

主要研究结果

1. Expression and purification of GST-fused recombinant N proteins
   成功表达分子量约84kDa（FeMV）和85kDa（CDV）的GST-N融合蛋白，为后续实验提供关键抗原。

2. Discussion
   发现FeMV抗体阳性率（20%）与日本既往研究一致，但首次证实6%样本存在CDV交叉反应。这种交叉反应可能导致FeMV血清学检测假阳性，需通过Western blotting等补充方法确认。

3. Conclusions
   研究明确证实猫体内天然产生的抗FeMV N蛋白抗体能与CDV N蛋白发生交叉反应，这种抗原相似性对基于N蛋白的免疫学检测方法开发具有重要警示意义。

该研究的创新价值在于首次在自然感染状态下揭示FeMV与CDV的免疫学交叉反应现象。这不仅解释了既往研究中部分矛盾结果的形成机制，更为未来开发高特异性诊断方法指明方向。特别是对于慢性肾病猫群的FeMV感染监测，研究建议采用多方法联合验证策略，避免单一免疫学检测可能导致的误判。这些发现对猫科动物疾病防控和野生动物保护均具有重要实践指导意义。