钠新鱼腥草素通过调控巨噬细胞TLR2/TRAF6/IRF5/ERK通路及miR-328-5p/miR-6975-3p表达增强抗烟曲霉感染的免疫调节机制

本研究针对侵袭性肺曲霉病（IPA）治疗难题，发现中药衍生物钠新鱼腥草素（SNH）通过双重机制增强巨噬细胞抗真菌功能：在未感染状态下激活TLR2/TRAF6/IRF5轴上调炎症因子（TNF-α/IL-1β），在感染状态下通过TLR2/TRAF6/ERK通路促进烟曲霉（A. fumigatus）清除，并首次揭示SNH通过抑制miR-328-5p/miR-6975-3p解除其对TLR2的负调控。该成果为IPA免疫治疗提供新靶点，发表于《Chinese Medicine》。

　　

烟曲霉（Aspergillus fumigatus）是侵袭性肺曲霉病（IPA）的主要病原体，每年导致全球约300万慢性阻塞性肺病患者死亡，免疫抑制患者死亡率高达50%。尽管现有抗真菌药物能直接抑制病原体，但宿主免疫调节策略的缺乏仍是临床治疗瓶颈。巨噬细胞作为肺部第一道防线，其功能状态决定抗真菌免疫应答效率，但调控巨噬细胞抗烟曲霉感染的精确分子机制尚不明确。传统中药鱼腥草的衍生物钠新鱼腥草素（SNH）虽具抗菌活性，其对IPA的免疫调节作用仍是未解之谜。

西南医科大学的研究团队通过构建免疫抑制小鼠IPA模型，结合体外巨噬细胞感染实验，首次系统阐明了SNH通过双重通路增强巨噬细胞抗烟曲霉感染的分子机制。研究采用组织病理学分析、流式细胞术检测免疫细胞浸润，并通过转录组测序、miRNA测序、分子对接等技术解析关键靶点。

SNH对IPA小鼠的治疗效果
小鼠模型显示SNH（10/30 mg/kg）治疗3-5天可显著降低肺组织真菌负荷（p<0.05），病理切片显示炎症浸润减少且肺泡结构完整。流式分析发现SNH治疗3天后中性粒细胞比例下降而T细胞比例上升，提示其通过调节免疫细胞平衡控制炎症。

SNH增强巨噬细胞功能
体外实验证实8μg/mL SNH处理4小时可使MH-S细胞（小鼠肺泡巨噬细胞系）对烟曲霉分生孢子的吞噬率提升50%，杀伤率提高40%（p<0.01）。值得注意的是，SNH不依赖活性氧（ROS）途径，而是通过独特信号通路发挥作用。

TLR2介导的双重调控机制
分子对接显示SNH与TLR2酪氨酸326位点结合（结合能-6.54 kcal/mol）。在未感染巨噬细胞中，SNH激活TLR2/TRAF6/IRF5轴，上调Ptgs2（2.1倍）和CCL7（1.8倍）等炎症相关基因；在感染状态下则通过TLR2/TRAF6/ERK1通路持续促进CXCL10（3.2倍）等趋化因子表达。CRISPR-Cas13d敲除TLR2证实该受体是SNH发挥作用的关键靶点。

miRNA负调控网络
miRNA测序发现SNH显著抑制miR-328-5p（2.56倍）和miR-6975-3p（4.96倍）。实验证实miR-328-5p通过结合IRF5 3'UTR抑制其表达，而miR-6975-3p直接靶向TLR2 mRNA。抑制剂转染实验显示阻断这两个miRNA可分别使巨噬细胞吞噬率和杀伤率提高25%和15%（p<0.05）。

该研究首次揭示SNH通过"受体结合-miRNA调控-通路激活"三级作用模式增强宿主抗真菌免疫：在分子层面，SNH直接结合TLR2并解除miR-328-5p/miR-6975-3p的抑制作用；在细胞层面，通过差异激活IRF5（未感染状态）和ERK1（感染状态）通路实现免疫稳态调控；在动物层面，显著改善IPA预后。这些发现不仅为理解巨噬细胞抗真菌机制提供新视角，更为开发基于宿主导向治疗的抗IPA药物奠定理论基础。

研究创新性地将传统中药成分的免疫调节作用与表观遗传调控相结合，提出的TLR2-miRNA-IRF5/ERK调控网络可能成为多种真菌感染治疗的共性靶标。未来研究可进一步探索SNH对T细胞亚群分化的影响，以及其在其他深部真菌感染中的应用潜力。