酶辅助超声提取优化与罗氏蔷薇果实黄酮纯化及其生物活性机制研究

【字体: 时间:2025年07月03日 来源:LWT 6.0

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  本研究针对罗氏蔷薇(Rosa sterilis)果实中黄酮类化合物提取效率低、活性机制不明的问题,通过酶辅助超声提取(EAUE)结合响应面优化技术,将总黄酮得率提升至147 mg/g(以芦丁计)。采用AB-8大孔树脂纯化使纯度达82.3%,通过UHPLC-MS/MS鉴定出32种黄酮成分。研究发现提取物对DPPH•/ABTS•+/羟基自由基清除及α-葡萄糖苷酶/胰脂肪酶抑制具有显著剂量效应,为功能性食品开发提供科学依据。

  

在功能性食品成分开发领域,野生植物资源中黄酮类化合物的高效提取与活性评价始终是研究热点。罗氏蔷薇(Rosa sterilis)作为我国特色蔷薇属植物,其果实富含黄酮却长期未被系统研究。传统提取方法存在效率低、活性成分破坏严重等问题,而现有研究对其降血糖、降脂等潜在生物活性机制缺乏深入解析。

针对上述问题,国内研究人员在《LWT》发表论文,通过多技术联用策略系统研究罗氏蔷薇果实黄酮的提取纯化工艺与生物活性。研究采用酶辅助超声提取(EAUE)技术结合响应面法优化参数,利用大孔吸附树脂纯化技术提升产物纯度,通过自由基清除实验和酶抑制实验评价活性,并采用超高效液相色谱-串联质谱(UHPLC-MS/MS)进行成分鉴定。

酶辅助超声提取优化
通过单因素实验确定最佳提取溶剂为50%乙醇,液固比50 mL/g。经响应面优化后提取时间缩短至70分钟,酶用量降至3%,总黄酮得率较传统方法提升14%,达147 mg/g干重。

大孔树脂纯化机制
筛选发现AB-8树脂吸附效果最佳,其过程符合伪二级动力学和Langmuir等温模型。热力学分析表明该吸附为自发放热过程,纯化后黄酮纯度从35.2%提升至82.3%。

生物活性评价
纯化产物对DPPH(IC50 12.3 μg/mL)、ABTS•+(IC50 9.8 μg/mL)和羟基自由基(IC50 15.6 μg/mL)清除能力显著。在酶抑制方面,对α-葡萄糖苷酶(IC50 26.4 μg/mL)和胰脂肪酶(IC50 31.2 μg/mL)的抑制呈典型剂量效应。

成分鉴定
UHPLC-MS/MS分析鉴定出32种黄酮,包括ugonin B、表儿茶素(epicatechin)衍生物和芹菜素(apigenin)衍生物等特征成分,这些化合物可能共同贡献于提取物的生物活性。

该研究首次建立罗氏蔷薇果实黄酮的高效提取纯化技术体系,阐明其多靶点生物活性机制。特别值得注意的是,提取物对糖脂代谢关键酶的双重抑制作用,为开发抗糖尿病和肥胖症的功能性食品提供了新原料选择。研究采用的"提取-纯化-鉴定-活性评价"技术路线,也为其他植物活性成分研究提供了可借鉴的方法学范式。论文中揭示的自发放热吸附机制,对大孔树脂在天然产物分离领域的应用具有重要指导价值。

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