真菌源新天然产物Phanerochanols A–C的发现及其抗炎活性研究

本研究从灵芝（Ganoderma applanatum）共生真菌Phanerochaete sp. GLQ06中分离鉴定出3种新型天然产物（phanerochanols A–C），其中化合物1通过抑制LPS诱导的RAW 264.7细胞一氧化氮（NO）产生，展现出优于地塞米松（10 μM）的抗炎活性，为天然抗炎药物开发提供了新候选分子。

　　

在天然药物研发领域，微生物次级代谢产物因其结构多样性和显著生物活性备受关注。炎症反应过度激活与多种慢性疾病密切相关，而现有抗炎药物如糖皮质激素存在明显副作用，亟需开发新型高效低毒化合物。传统药用真菌作为天然活性分子的重要来源，其共生真菌的代谢产物研究仍存在大量未开发空间。

中国科学院的研究团队从灵芝子实体中分离获得一株共生真菌Phanerochaete sp. GLQ06，通过综合运用核磁共振（NMR）波谱解析、圆二色谱（ECD）计算等技术，鉴定了3个结构新颖的代谢产物：新骨架化合物phanerochanol A（1）及两种stachyline衍生物phanerochanols B（2）和C（3）。研究采用脂多糖（LPS）诱导的巨噬细胞炎症模型，发现化合物1在10 μM浓度下对一氧化氮（NO）生成的抑制率显著超过临床常用药地塞米松，且无显著细胞毒性，相关成果发表于《Natural Product Research》。

关键技术方法
研究采用静置培养获取真菌发酵产物，经硅胶柱层析和高效液相色谱（HPLC）分离纯化。通过高分辨质谱（HRESIMS）确定分子式，结合一维/二维NMR（¹H, ¹³C, HSQC, HMBC）解析平面结构，利用ECD计算确定绝对构型。生物活性评价采用MTT法检测细胞活力，Griess法测定NO含量。

结构解析
通过NMR数据对比发现，化合物1为罕见的苯并呋喃-萘酚杂合骨架，其C-3位羟基构型经ECD计算确认为S型；化合物2和3则具有stachyline类特征结构，分别带有独特的C-14甲氧基和C-15羟基取代。

抗炎活性
在LPS刺激的RAW 264.7细胞模型中，化合物1使NO产量降低至对照组的38.7±2.1%（地塞米松组为52.4±3.6%），IC₅₀值为7.2 μM。Western blot分析显示其通过抑制iNOS（诱导型一氧化氮合酶）蛋白表达发挥作用，且50 μM浓度下细胞存活率仍>90%。

讨论与意义
该研究首次报道了Phanerochaete属真菌产生苯并呋喃-萘酚杂合骨架代谢物的能力，拓展了真菌化学多样性认知。化合物1的显著抗炎活性提示其可作为先导化合物用于免疫调节药物开发，其独特结构为构效关系研究提供了新模板。研究同时证实真菌-宿主共生关系能激发特殊代谢途径，为天然产物挖掘提供了新策略。