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基于宏基因组与宏转录组学解析深海微生物对乳酸基聚酯(LAHB)的生物降解机制
【字体: 大 中 小 】 时间:2025年07月03日 来源:Polymer Degradation and Stability 6.3
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为解决传统生物基聚酯PLA难以在海洋环境降解的问题,日本研究团队通过宏基因组/宏转录组学技术,首次揭示重组大肠杆菌合成的乳酸-3-羟基丁酸共聚物(LAHB)在855米深海的降解机制。研究发现LAHB特异性富集γ-变形菌纲微生物,其分泌的PHB解聚酶(PHB depolymerases)及UBA7957菌属的基因簇协同驱动降解过程,为开发深海可降解塑料提供理论依据。
海洋塑料污染已成为全球性环境危机,据OECD统计,2019年约170万吨塑料垃圾进入水体,其中深海成为持久性塑料的终极归宿。传统生物基塑料聚乳酸(polylactide, PLA)虽源自可再生资源,却在海洋环境中表现出顽固性,甚至在深海条件下数年不降解。这一困境促使科学家寻求新型可降解材料。日本研究团队将目光投向乳酸-3-羟基丁酸共聚物[poly(D-lactide-co-3-hydroxybutyrate), LAHB],这种通过重组大肠杆菌(Escherichia coli)合成的杂交聚酯,兼具PLA的力学性能和聚羟基脂肪酸酯(polyhydroxyalkanoates, PHA)的生物可降解性,但其在高压低温的深海环境中的命运仍是未解之谜。
研究团队采用深海原位实验结合多组学分析,在相模湾初岛海域855米深处(水温3.6°C,压力8.5MPa)部署含6%和13%乳酸单元的LAHB薄膜(P6LAHB/P13LAHB),以PLA和PHBV[poly(3HB-co-3HV)]为对照。通过宏基因组测序(metagenomics)和宏转录组测序(metatranscriptomics)解析塑料圈(plastisphere)微生物群落,结合代谢重建揭示降解机制。
LAHB生产与表征
通过工程化大肠杆菌表达质粒pTV118N-PCTMe-phaC1Ps(ST/QK)AB合成LAHB,差示扫描量热仪(DSC)显示P6LAHB和P13LAHB的熔点分别为143°C和128°C,结晶度随LA含量增加而降低。
深海环境降解行为
部署7-13个月后,两种LAHB薄膜均出现明显生物侵蚀痕迹,重量损失达15-20%,而PLA对照组无变化。共聚焦显微镜观察到LAHB表面形成50-100μm厚生物膜,其厚度显著高于PHBV组,表明LAHB特异性诱导微生物定植。
塑料圈微生物组特征
从LAHB生物膜中重建37个宏基因组组装基因组(MAGs),其中γ-变形菌纲(Gammaproteobacteria)的Alcanivorax、Marinobacterium、UBA7957和Thalassolituus四属与LAHB降解显著相关。值得注意的是,这三个菌属的MAGs编码大量分泌型PHB解聚酶,其基因拷贝数远超PHBV降解菌群。
原位基因表达谱
宏转录组数据显示,PHB解聚酶基因表达量占LAHB降解菌总转录本的12-18%。尤为关键的是,UBA7957菌株表现出对LAHB的特异性降解能力,其基因组中一个包含二聚体水解酶(dimer hydrolase)、推定转运蛋白和丙酰辅酶A转移酶(propionyl CoA-transferase)的基因簇表达量上调30倍,暗示该菌可能通过"解聚-转运-代谢"三联机制矿化LAHB。
这项研究首次绘制出LAHB在深海的生物降解路线图:特定γ-变形菌通过分泌PHB解聚酶裂解聚合物主链,释放的寡聚物被UBA7957等菌株转运至胞内,经酯酶和CoA转移酶最终矿化为CO2和水。该发现突破了对PLA类材料海洋降解性的传统认知,为设计具有"深海可降解开关"功能的下一代生物塑料提供关键靶点。研究采用的基因组中心宏转录组学策略(genome-centric metatranscriptomics)为复杂环境中的材料-微生物互作研究树立了新范式。论文发表于《Polymer Degradation and Stability》,为应对深海塑料污染提供兼具科学性和工程价值的解决方案。
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