Biosynex AMPLIQUICK粪便细菌学PCR试剂盒在急性社区获得性腹泻病原体检测中的临床性能评估

本研究针对急性社区获得性腹泻病原体快速诊断的临床需求，评估了Biosynex AMPLIQUICK粪便细菌学PCR试剂盒的多重检测性能。通过对401份回顾性与前瞻性粪便样本分析，验证该试剂盒对Campylobacter spp.、Salmonella spp.等8类病原体的检测灵敏度达98.24-100%，显著优于传统培养法，为细菌性胃肠炎的精准诊断提供高效解决方案。

　　

研究背景
腹泻是全球儿童死亡的主要原因之一，世界卫生组织数据显示2021年近44万五岁以下儿童因此丧生。细菌性病原体占腹泻病例的10-20%，但传统粪便培养方法存在明显局限：需耗时2-4天，且对难培养病原体（如特定大肠杆菌pathovar）敏感性不足。虽然分子诊断技术如Seegene Allplex和BD MAX系统已提升检测效率，但多数需专用设备且成本较高。在此背景下，Biosynex公司开发的开放式多重PCR系统AMPLIQUICK粪便细菌学试剂盒，以其兼容常规实验室设备的特性，为病原体筛查提供了新选择。

关键技术方法
研究采用回顾性（194份）与前瞻性（207份）样本，通过复合参考标准（CRS）评估性能。使用NucleoMag Dx Pathogen试剂盒提取DNA，在Bio-Rad CFX96仪上进行AMPLIQUICK检测，靶向16S rRNA、毒力基因（如stx、eae）等标记。对不一致结果采用Seegene Gastrointestinal Panel 1/2或单重PCR（如aap基因测序）验证。

研究结果

回顾性研究

• Campylobacter spp.检测：113份阳性样本全部检出，额外发现2例C. upsaliensis（经单重PCR确认）
• Salmonella spp.检测：29份阳性中1例假阳性（样本n°180），5例低载量样本被成功检出
• EHEC检测：22份阳性中2例假阴性（n°180/190），但发现6例培养阴性病例

前瞻性研究

• 多重病原体识别：在54份阴性样本中检出3例Campylobacter、3例EPEC（肠致病性大肠杆菌）
• 扩展检测范围：新发现25例EAEC（肠集聚性大肠杆菌）、7例ETEC（产肠毒素大肠杆菌）

联合分析

• 总体灵敏度：对主要病原体（除Salmonella 98.24%）均达100%
• 额外检出：相比培养法多发现89例阳性，包括34例Aeromonas spp.和37例EAEC

结论与意义
该研究证实AMPLIQUICK试剂盒具有三大优势：

1. 高效性：单次检测覆盖8类病原体，尤其对难培养的E. coli pathovar（如EAEC、ETEC）和Yersinia致病株特异性识别
2. 精准性：通过双重内控（IC/IPC）和阈值设定（如Campylobacter Ct<36），有效避免假阴性
3. 临床实用性：开放式设计兼容常规PCR仪，为资源有限地区提供可行性方案

局限性在于需严格防污染，且对ETEC（n°267）和EHEC（n°180/190）的少数假阳性/阴性需结合临床判断。该成果发表于《BMC Microbiology》，为细菌性腹泻的分子诊断树立了新标杆，尤其对暴发监测和抗生素合理使用具有重要价值。