抗胸腺细胞球蛋白(ATG)通过补体依赖和非依赖途径在PTCL异种移植模型中展现抗肿瘤效应

本研究针对外周T细胞淋巴瘤(PTCL)治疗响应差、预后不佳的临床难题，探索了抗胸腺细胞球蛋白(ATG)单药及联合化疗的协同作用机制。通过体外实验证实ATG通过激活FAS/CD95通路诱导caspase-8依赖性凋亡，并首次揭示其补体依赖性细胞毒性(CDC)效应；体内实验证明ATG联合阿霉素显著抑制异种移植瘤生长，为PTCL患者提供新的治疗策略。

　　

外周T细胞淋巴瘤(PTCL)作为非霍奇金淋巴瘤中预后最差的亚型，5年生存率不足30%。尽管造血干细胞移植(HSCT)带来曙光，但高达40%患者仍面临早期复发。大连医科大学第二医院血液科团队在《Clinical and Experimental Medicine》发表的研究，揭示了抗胸腺细胞球蛋白(ATG)这一传统免疫抑制剂的全新抗肿瘤机制。

研究团队采用Hut78、Karpas299和SU-DHL-1三种PTCL细胞系，通过CCK-8检测发现ATG呈剂量依赖性抑制细胞活力（50-5000μg/mL）。特别值得注意的是，当补充20%兔血清补体后，SU-DHL-1细胞的死亡率从34.89%飙升至94.46%，首次证实ATG可通过补体依赖性细胞毒性(CDC)途径高效杀灭PTCL细胞。

关键实验技术包括：

1. 异种移植模型构建（BALB/c小鼠皮下接种Karpas299细胞）
2. 流式细胞术检测凋亡（Annexin V/PI双染）
3. 线粒体膜电位(△Ψm)检测（JC-1荧光探针）
4. 蛋白质印迹分析凋亡通路（PARP/caspase-3/8切割）
5. 免疫组化验证体内凋亡标志物（cleaved PARP/caspase-3）

ATG抑制PTCL细胞生长、侵袭和集落形成
剂量梯度实验显示50μg/mL ATG即可使Hut78细胞凋亡率达51.95%，200μg/mL时集落形成减少80%。Transwell实验证实ATG显著降低细胞侵袭能力，其中Hut78细胞对ATG最敏感。

ATG诱导外源性凋亡途径
Western blot显示caspase-8/-3和PARP切割片段增加，而caspase-9无变化。预处理z-IETD-fmk（caspase-8抑制剂）使凋亡率降低60%，qPCR证实FAS mRNA表达上调3.5倍，揭示ATG通过FAS/CD95通路激活外源性凋亡。

补体协同增强细胞毒性
添加补体使低剂量ATG（50μg/mL）的细胞死亡率从54.33%提升至92.22%，高剂量组（500μg/mL）更达94.91%，证实CDC效应是重要杀伤机制。

体内协同抗肿瘤效应
小鼠模型显示ATG高剂量组（10mg/kg）肿瘤体积缩小65%，与阿霉素联用组较单药组进一步抑制40%。值得注意的是，联合组未出现明显毒性反应，为临床转化提供安全依据。

该研究突破性发现ATG可通过双重机制（凋亡+CDC）靶向PTCL，尤其补体系统的放大效应为克服耐药提供新思路。病例报告显示ATG联合BEAM方案使复发AILT患者获得3.5年无病生存，支持开展前瞻性临床试验。这些发现不仅为PTCL治疗开辟新途径，更启示老药新用的转化医学价值——传统免疫抑制剂可能成为对抗血液肿瘤的"秘密武器"。