KIAA1429磷酸化通过激活FZD7-Wnt信号通路促进BRAFV600E突变结直肠癌奥沙利铂耐药

本研究针对结直肠癌（CRC）患者奥沙利铂（OXA）耐药难题，揭示了m6A甲基转移酶复合物关键组分KIAA1429的磷酸化修饰通过调控亚细胞定位激活Wnt信号通路的新机制。中山大学附属第六医院团队发现BRAF介导的KIAA1429-S1579位点磷酸化驱动其胞质聚集，通过稳定FZD7 mRNA增强β-catenin核转位，最终促进肿瘤干细胞特性及化疗耐药。该研究为BRAF突变CRC患者的精准治疗提供了新靶点。

　　

在全球癌症负担排名中，结直肠癌（CRC）长期占据发病率第三、死亡率第二的位置。尽管以奥沙利铂（OXA）为基础的新辅助化疗已成为标准治疗方案，但耐药性导致的治疗失败仍是临床面临的重大挑战。尤其值得注意的是，约12%的转移性CRC患者携带BRAF^V600E突变，这类患者往往表现出更强的化疗抵抗性。与此同时，RNA表观遗传修饰领域的研究发现，N⁶-甲基腺苷（m⁶A）修饰在肿瘤耐药中扮演关键角色，但其在CRC中的具体机制仍不明朗。

中山大学附属第六医院黄亮、施昀星团队在《Journal of Experimental》发表的研究，首次揭示了m⁶A甲基转移酶复合物最大组分KIAA1429的亚细胞分布与化疗响应的关联。通过分析2014-2021年间接受新辅助治疗的CRC患者样本，研究者观察到KIAA1429的核质分布呈现显著异质性——核定位患者表现出更好的肿瘤退缩分级（TRG）和生存预后。这一现象提示，KIAA1429的功能可能不仅取决于表达量，更与其细胞定位密切相关。

研究团队采用RNA测序（RNA-seq）、免疫共沉淀-质谱（IP-MS）等技术鉴定出BRAF是KIAA1429的结合激酶，并通过构建S1579A突变体证实该位点磷酸化是调控核质分布的关键开关。在机制层面，胞质聚集的KIAA1429通过结合FZD7 mRNA的3'UTR增强其稳定性，激活经典Wnt/β-catenin通路。动物实验显示，过表达野生型KIAA1429（而非S1579A突变体）的移植瘤对OXA治疗显著抵抗，且这种效应可被FZD7敲低所逆转。

关键技术方法包括：1）临床队列分析（n=281例CRC患者样本）；2）亚细胞分离与免疫荧光定位；3）RNA免疫沉淀（RIP）验证KIAA1429-FZD7相互作用；4）皮下移植瘤模型评估体内耐药性；5）转录组测序筛选Wnt通路激活标志。

主要研究发现

1. KIAA1429核质分布预测化疗响应
   通过281例CRC患者标本的免疫组化分析，发现胞质高表达KIAA1429与TRG3（无治疗反应）显著相关（p<0.01），核定位患者5年生存率提高37%。

2. BRAF介导S1579磷酸化调控定位
   质谱鉴定出KIAA1429-S1579磷酸化位点，免疫共沉淀证实BRAF突变细胞中该修饰增强。突变实验显示S1579A突变体与核转运蛋白importin α5结合增强，导致核聚集。

3. 胞质KIAA1429激活Wnt通路
   RNA-seq揭示KIAA1429-WT组Wnt信号显著激活（KEGG富集p=3.2×10^-5）。RIP-qPCR显示KIAA1429-WT对FZD7 mRNA的结合能力是S1579A突变体的30倍（p<0.001）。

4. FZD7依赖性耐药机制
   在SW480细胞中，KIAA1429-WT使OXA IC₅₀提升4.7倍，而FZD7敲除可完全逆转此效应（p<0.01）。动物实验证实仅KIAA1429-WT组肿瘤体积增长2.8倍（vs SA组）。

这项研究首次阐明BRAF-KIAA1429-FZD7轴在CRC耐药中的级联调控作用：BRAF突变→KIAA1429-S1579磷酸化→胞质聚集→FZD7 mRNA稳定→Wnt通路激活→干细胞特性增强。不仅为BRAF突变CRC患者提供了预测标志物（KIAA1429亚细胞分布），更提示联合BRAF抑制剂与Wnt通路阻断剂可能成为克服耐药的新策略。值得注意的是，KIAA1429的"定位决定功能"特性突破了传统m⁶A研究范式，为表观转录组学与蛋白翻译后修饰的交叉研究开辟了新方向。