靶向PLK1的小分子抑制剂MLN0905：克服胰腺癌吉西他滨耐药的新策略

本研究针对胰腺癌(PC)患者对吉西他滨(gemcitabine)耐药这一临床难题，首次系统评估了PLK1抑制剂MLN0905在耐药性PC中的治疗潜力。通过体内外实验证实，MLN0905通过特异性抑制PLK1磷酸化，诱导DNA损伤标志物γH2A.x和PHH3表达，导致G2/M期阻滞和细胞凋亡，显著抑制耐药性肿瘤生长。该研究为克服PC化疗耐药提供了新靶点和候选药物，具有重要转化价值。

　　

胰腺癌被称为"癌中之王"，五年生存率不足10%，其治疗面临两大困境：一是疾病进展迅猛，二是对一线化疗药物吉西他滨极易产生耐药性。当肿瘤细胞对吉西他滨"刀枪不入"时，临床上往往束手无策。更棘手的是，科学家们发现耐药机制复杂多样，传统"试错法"开发新药收效甚微。在这样的背景下，三门县人民医院中心实验室和三门县人民医院普外科的研究团队将目光投向了一个关键细胞周期调控因子——Polo样激酶1(Polo-like kinase 1, PLK1)。

PLK1如同细胞分裂的"指挥官"，在DNA复制和染色体分离中扮演核心角色。既往研究显示，PLK1在多种癌症中异常高表达，且与不良预后相关。更有趣的是，有证据表明PLK1可能通过调控p53/CDK1通路影响化疗敏感性。但一个关键问题悬而未决：靶向PLK1能否逆转胰腺癌的吉西他滨耐药？为回答这个问题，研究团队选择了一种新型小分子抑制剂MLN0905展开系统研究。这种源自苯并二氧戊环结构的化合物，能以极高特异性"锁住"PLK1的活性位点，此前在淋巴瘤模型中已展现抗癌潜力。

研究人员采用多组学分析结合功能实验的策略。首先通过GEPIA数据库挖掘发现PLK1在胰腺癌组织显著高表达且与不良预后相关。随后建立吉西他滨耐药细胞株BxPC-GEM20（从亲代BxPC-3细胞经浓度梯度诱导获得），并选用天然耐药株CFPAC-1作为对照。关键技术包括：MTT法检测细胞活力、流式细胞术分析细胞周期和凋亡、Western blot检测PLK1/pPLK1等蛋白表达、免疫荧光观察DNA损伤标志物γH2A.x和PHH3定位，以及裸鼠移植瘤模型评估体内药效。所有实验均设置三重复，数据经SPSS 24.0和GraphPad Prism 10.0分析。

研究结果揭示了一系列重要发现：

PLK1在PC细胞中高表达
生物信息学分析显示PLK1在胰腺癌组织显著上调（log2[TPM+1]转换后P<0.01）。Western blot证实耐药株BxPC-GEM20中PLK1及其磷酸化形式pPLK1表达量是亲代细胞的2.3倍。MLN0905处理可剂量依赖性降低pPLK1水平（50nM时降低68%）。

MLN0905抑制PC细胞增殖
MTT实验显示MLN0905对三种细胞系的IC₅₀均在低纳摩尔范围（BxPC-GEM20为12.3nM）。克隆形成实验进一步证实，50nM MLN0905可使耐药细胞集落数减少82%。

诱导DNA复制缺陷
免疫荧光显示MLN0905处理组γH2A.x焦点数增加5.7倍，PHH3信号增强3.2倍。Western blot检测到pCDK1下调而p53上调，提示PLK1-CDK1-p53通路被激活。

引发细胞周期阻滞和凋亡
流式细胞术显示MLN0905使G2/M期细胞比例从12.4%增至47.8%（P<0.001）。Annexin V-FITC/PI双染显示早期凋亡率提升9.3倍。

体内抑制肿瘤生长
在BxPC-GEM20移植瘤模型中，7.5mg/kg MLN0905治疗27天使肿瘤体积缩小73%（P<0.0001）。免疫组化显示Ki67阳性率降低81%，CD31微血管密度减少69%。

安全性评估
治疗组小鼠体重无显著变化，肝肾功能指标（ALT/AST/GLU/Cr）均在正常范围。H&E染色未见肝肾组织病理改变。

这项研究首次系统阐明MLN0905通过靶向PLK1克服胰腺癌吉西他滨耐药的多层次机制。不同于传统化疗药物，MLN0905精准打击肿瘤细胞的"分裂引擎"，使其停滞在G2/M期并最终走向凋亡。尤其值得注意的是，该药物对耐药株的抑制效果优于亲代细胞，暗示PLK1抑制剂可能具有"耐药逆转"特性。在转化医学层面，研究证实MLN0905具有良好的安全性特征，为后续临床试验奠定基础。

当然，该研究也存在若干局限：尚未阐明MLN0905是否影响肿瘤微环境中的免疫细胞浸润；对PLK1下游效应分子的调控网络解析不够全面；缺乏与其他PLK1抑制剂（如BI2536）的头对头比较。未来研究可探索MLK0905与免疫检查点抑制剂的联用策略，或开发基于PLK1表达水平的精准治疗预测模型。

这项发表于《European Journal of Medical Research》的工作，为胰腺癌治疗提供了新思路——与其被动应对耐药，不如主动靶向耐药相关的核心激酶。正如研究者所言："当肿瘤细胞对传统化疗关上大门时，PLK1抑制剂可能是打开另一扇窗的钥匙。"这种靶向治疗策略不仅适用于胰腺癌，也为其他高耐药性恶性肿瘤提供了可借鉴的范式。