异体双阴性T细胞（DNTs）预防高危急性髓系白血病（AML）异基因造血干细胞移植后复发的安全性与免疫调节作用研究

针对高危AML患者异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）后复发率高达40%的临床难题，中国科学技术大学附属第一医院团队开展了一项开创性研究，探索第三方供体来源的双阴性T细胞（allo-DNTs）作为免疫调节剂预防复发的潜力。这项I期临床试验（NCT05858814）显示，allo-DNTs输注无需淋巴清除预处理，无剂量限制毒性或严重移植物抗宿主病（GvHD），66.7%患者维持微小残留病（MRD）阴性完全缓解（CR）超24个月。研究首次证实allo-DNTs通过激活CD8+ T细胞（上调颗粒酶B和干扰素-γ）发挥双重免疫调节作用，为预防移植后复发提供了安全有效的新策略。

　　

急性髓系白血病（AML）是成人最常见的急性白血病类型，尽管异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）已成为高危患者的根治性手段，但约40%患者面临移植后复发的致命威胁。传统干预措施如供体淋巴细胞输注（DLI）虽能增强移植物抗白血病（GVL）效应，却常伴随移植物抗宿主病（GvHD）和严重感染风险。更棘手的是，复发后患者中位生存期仅3-6个月，亟需开发兼具强效抗肿瘤活性和低毒性的新型免疫疗法。

中国科学技术大学附属第一医院血液科团队将目光投向一类特殊的T细胞亚群——双阴性T细胞（DNTs，CD3⁺CD4^-CD8^-）。这类仅占外周血淋巴细胞1-5%的细胞，在前期治疗复发AML的I期试验（ChiCTR-1900022795）中已展现50%的完全缓解率且不诱发GvHD。基于此，研究者创新性地提出假设：将allo-DNTs作为预防性免疫调节剂，能否在移植后早期阻断复发？这项发表于《Experimental Hematology》的I期研究给出了肯定答案。

研究采用第三方健康供体外周血来源的DNTs，通过体外扩增获得治疗级细胞制剂。6例高危AML患者（中位年龄44岁）在移植后60-100天内接受3次allo-DNTs输注（剂量1×10⁸或1.5×10⁸ cells/kg），未使用淋巴清除预处理。通过流式细胞术监测细胞亚群、酶联免疫吸附试验检测细胞因子、体外共培养实验解析机制，并结合长期随访评估疗效。

安全性分析揭晓了令人振奋的结果：72.2%输注仅出现短暂发热/头痛（24小时内缓解），1例发生自限性轻度细胞因子释放综合征（CRS）。尤为关键的是，未观察到剂量限制毒性或DNT相关急性GvHD，打破了传统免疫疗法"疗效与毒性并存"的魔咒。

临床疗效数据更显突破性：中位随访20.9个月时，4例（66.7%）患者保持MRD阴性完全缓解，最长无复发生存超24个月。1例伴TP53/IDH2突变和复杂核型的难治性患者虽最终复发，但另一例分子复发者经干扰素α2b干预后重获MRD阴性状态，提示allo-DNTs可能增强后续治疗敏感性。

机制探索发现：缓解患者外周血中 donor-DNTs 可持续检出达360天，伴随CD8⁺ T细胞绝对值（389,614 vs 3,901/μL）和颗粒酶B⁺效应记忆T细胞（Tem）比例显著升高。

体外实验进一步证实，allo-DNTs能特异性激活患者CD8⁺ T细胞，使其干扰素-γ（IFN-γ）和颗粒酶B（GZMB）表达上调3-5倍，这种"教官效应"在复发患者中完全缺失。

这项研究开创性地证实了allo-DNTs的双重价值：既作为天然免疫战士直接杀伤残留白血病细胞，又充当免疫系统的"智能开关"，精准增强CD8⁺ T细胞抗肿瘤活性而不引发GvHD。其"即用型"特性（off-the-shelf）更突破了传统个体化细胞治疗的成本和时间瓶颈。尽管样本量有限，但为高危AML移植后防复发提供了全新范式，相关机制发现也为实体瘤免疫治疗研究开辟了新思路。随着II期试验的推进，这种"免疫调节型细胞疫苗"有望改写血液肿瘤移植后管理指南。