中国浙江地区健康成人外周血NK细胞、单核细胞及树突状细胞亚群的年龄分层参考区间研究

本研究针对中国浙江地区健康成人，首次建立了外周血自然杀伤(NK)细胞、单核细胞(Mo1/Mo2/Mo3)和树突状细胞(pDC/mDC)亚群的年龄分层参考区间。通过双平台流式检测技术分析316名18-65岁志愿者的免疫表型，发现NK细胞比例和CD56high亚群随年龄增长显著升高，而经典单核细胞(Mo1)和DC绝对计数呈年龄相关性下降。该成果为华东地区免疫相关疾病的精准诊断提供了重要基准。

　　

免疫细胞作为人体防御系统的重要组成部分，其数量和功能变化与多种疾病密切相关。然而，由于地域、年龄和种族等因素的影响，目前缺乏针对中国华东地区人群的外周血自然杀伤(NK)细胞、单核细胞和树突状细胞(DC)亚群的标准化参考范围。这一问题严重制约了该地区免疫相关疾病的精准诊断和治疗监测。

为解决这一临床需求，温州医科大学附属东阳医院的研究团队开展了一项横断面研究。该研究严格遵循CLSI EP28-A3c指南，采用13色流式细胞仪(Beckman Coulter DxFlex)和XN-9000血液分析仪(SYSMEX)双平台检测技术，对316名18-65岁浙江健康成人进行免疫表型分析。通过非参数百分位数法(P_2.5-P_97.5)建立了年龄分层的参考区间，并在40人独立队列中验证了其可靠性。

主要技术方法
研究团队招募浙江地区健康志愿者，采用13色流式抗体组合(含CD45-KO、CD16-PB等标记)进行免疫分型，通过逐步设门策略区分NK细胞(CD56^high、CD56⁺CD16⁺、CD56⁺CD16^-)、单核细胞亚群(Mo1:CD14⁺CD16^-；Mo2:CD14⁺CD16⁺；Mo3:CD14^dimCD16⁺)及DC亚群(pDC:CD123⁺；mDC:CD11c⁺)。绝对计数通过流式比例与血液分析仪数据相乘获得。

研究结果

Establishment of reference intervals
研究建立了18-40岁和41-65岁两组的参考区间。关键发现包括：NK细胞占淋巴细胞比例在年轻组为4.87-35.8%，年长组显著升高至5.83-42.2%(p=0.039)；CD56^high NK亚群比例在年轻组更高(0.58-8.89% vs 0.44-7.37%，p=0.002)；非经典单核细胞(Mo3)比例随年龄增长明显增加(3.28-17.0% vs 5.12-23.3%，p<0.001)。

Age validation of reference intervals
验证队列显示≥95%的符合率，证实参考区间的可靠性。例如DC占总白细胞比例在年轻组为0.26-1.01%，年长组降至0.21-0.88%(p<0.001)。

Sex-stratified linear regression analysis
线性回归分析揭示：年龄与NK细胞比例(β=0.167, p=0.029)、Mo3亚群(比例和绝对计数)呈正相关，而与pDC/mDC绝对计数、Mo1/DC亚群呈负相关(p<0.05)。值得注意的是，性别对年龄相关的免疫细胞动态变化无显著调节作用(所有交互项p>0.05)。

讨论与结论
该研究首次为浙江地区建立了具有人口特异性的免疫细胞参考区间，揭示了NK细胞和单核细胞亚群的年龄依赖性变化规律。这些发现为华东地区感染性疾病、肿瘤和自身免疫病的免疫评估提供了重要基准。特别是Mo3亚群的年龄相关性增加可能反映了慢性低度炎症状态，而DC计数的年龄相关性下降提示免疫功能衰老。研究采用的标准化流程和双平台方法增强了数据的可靠性，但未来需要扩大样本量以细化亚组分析。这项发表于《BMC Immunology》的成果，为区域化精准医疗实践提供了关键工具。