杜鹃花提取物通过调控Dvl1/Wnt1/β-catenin/GSK-3β信号通路治疗类风湿性关节炎的机制研究

本研究针对类风湿性关节炎（RA）治疗中药物副作用大、疗效有限的临床难题，通过高通量筛选和网络药理学分析，首次揭示杜鹃花（Rhododendron molle G. Don）提取物（RME）的核心活性成分群（Rhodojaponin-III等4种）可通过多靶点作用抑制Dvl1/Wnt1/β-catenin/GSK-3β信号通路，显著降低AIA大鼠关节炎指数（AI）和促炎因子（TNF-α/IL-1β/IL-6/IL-17A）水平，其疗效与雷公藤多苷片相当。该研究为开发低毒高效的植物源抗RA药物提供了新策略。

　　

类风湿性关节炎（Rheumatoid Arthritis, RA）作为一种"不死的癌症"，其滑膜组织异常增生和骨侵蚀特征让全球数千万患者饱受折磨。尽管现有药物如非甾体抗炎药（NSAIDs）和慢作用抗风湿药（SAARDs）能缓解症状，但长期使用导致的肝损伤和感染风险犹如悬在患者头上的达摩克利斯之剑。在这种背景下，兼具疗效和安全性优势的药用植物成为研究热点——其中杜鹃花（Rhododendron molle G. Don）在民间医学中早有镇痛消炎的应用记载，但其抗RA的分子机制却如同未解密码，更因其成分复杂性和潜在毒性制约着临床转化。

湖南中医药大学的研究团队在《BMC Complementary Medicine and Therapies》发表的研究，如同打开了一把精密的多靶点生物锁。通过HPLC-ELSD（高效液相色谱-蒸发光散射检测）锁定RME中的4种关键活性成分（Rhodojaponin-III、Rhodojaponin-II、Hyperoside、Quercetin）后，研究者构建了"成分-靶点-通路"三维网络：首先整合GEO数据库GSE55457数据集与GeneCards等平台的6842个RA相关基因，运用STRING数据库构建蛋白质互作（PPI）网络；接着通过拓扑分析筛选出GSK-3β和Dvl1这两个枢纽靶点，分子 docking显示其与活性成分结合能均<-5 kcal/mol；最终在佐剂性关节炎（AIA）大鼠模型中验证，发现152.55 mg/kg剂量RME可使滑膜组织Dvl1蛋白表达降低61.2%，显著优于阳性对照药（P<0.001）。

关键技术方法包括：1）基于HPLC-ELSD的活性成分定量分析；2）整合GSE55457转录组数据的网络药理学预测；3）分子对接验证核心靶点结合活性；4）建立AIA大鼠模型进行体内验证；5）Western blot检测Wnt通路关键蛋白表达。

结果部分核心发现：

1. 质量控质与活性成分
   通过建立4种活性成分的回归方程（r²>0.999），确认RME中Rhodojaponin-III含量达0.866%，为后续研究提供物质基础。

   

2. 网络分析揭示作用枢纽
   从378个RA差异基因中筛选出Wnt/JAK-STAT等关键通路，其中Dvl1在PPI网络中节点度值最高（Degree=28），提示其为信号转导的"交通枢纽"。

   

3. 体内疗效验证
   高剂量RME（152.55 mg/kg）使AIA大鼠足趾厚度减少47.3%，疗效与雷公藤多苷相当（P>0.05），且显著降低脾脏指数（P<0.01）。

   

4. 机制阐释
   Western blot显示RME可剂量依赖性抑制p-GSK-3β(Ser9)磷酸化（RME-H组降低68.4%），同时下调β-catenin核转位，阻断下游促炎因子转录。

   

这项研究的意义在于三方面突破：首先，通过"计算预测-实验验证"范式，首次阐明杜鹃花通过Dvl1/Wnt轴治疗RA的分子机制；其次，急性毒性试验（LD₅₀=1340 mg/kg）证实其安全性优于化学药物；更重要的是，发现RME可同时调控GSK-3β磷酸化和β-catenin降解双重环节，这种"双靶点协同"作用模式为开发新一代抗RA药物提供了独特思路。正如研究者Wenya Mei等指出，该发现不仅为传统药用植物的现代化研究树立了范本，其揭示的Wnt通路调控机制还可能拓展至骨代谢疾病等其他领域。未来研究可进一步通过基因敲除等技术验证Dvl1的调控枢纽地位，并探索多成分协同作用的精确配比规律。