实时监测循环肿瘤细胞HER2表达优化转移性胃癌靶向治疗策略

本研究针对转移性胃癌(mGC)中HER2状态评估的时空异质性难题，开发了基于On-chip Sort系统的循环肿瘤细胞(CTC)实时检测技术。通过分析27例患者CTC的HER2表达与上皮-间质转化(EMT)特征，发现组织HER2阴性但CTC HER2阳性患者预后最差（中位PFS仅7.0个月），揭示CTC检测可识别潜在HER2靶向治疗获益人群。该研究为精准医疗提供了动态监测新范式。

　　

胃癌是全球癌症相关死亡的第三大原因，每年新增病例超百万。尽管HER2靶向药物如曲妥珠单抗改善了HER2阳性患者的预后，但肿瘤组织的时空异质性和动态演变导致传统活检难以准确评估HER2状态。更棘手的是，约15-20%的胃癌患者存在HER2过表达，这些肿瘤往往更具侵袭性，迫切需要开发实时监测技术来指导精准治疗。

日本埼玉县立医科大学的研究团队在《Scientific Reports》发表了一项突破性研究。他们采用On-chip Sort微流控系统，对27例转移性胃癌患者进行CTC捕获，通过荧光标记定量分析HER2表达，并结合上皮标志物细胞角蛋白与间质标志物波形蛋白计算EMT指数。研究还运用全基因组扩增和53个癌症相关基因panel进行靶向测序，揭示了CTC的分子特征与临床结局的关联。

主要技术方法
研究团队采集27例mGC患者外周血样本，使用含红细胞裂解液的Cell-Free DNA BCT管保存。通过四步分选流程：首次分选基于细胞角蛋白阳性，后续分选结合CD45阴性及HER2/波形蛋白荧光信号。采用Ampli1 WGA试剂盒对CTC DNA全基因组扩增，使用Oncomine Tumor Mutation Load Assay检测409个癌症相关基因中的53个关键基因突变。组织HER2状态通过IHC(免疫组化)和FISH(荧光原位杂交)双确认。

Clinicopathological features and treatments in 27 patients
队列中48.1%患者组织HER2阳性（13/27），所有患者均接受S-1联合奥沙利铂化疗，HER2阳性组加用曲妥珠单抗。CTC检测在23例患者中实现100%捕获率，中位CTC计数9个（1-39），57%患者CTC与组织HER2状态一致。值得注意的是，8例组织阴性但CTC HER2阳性患者被重新分类为B组。

Detection of CTCs to investigate HER2 expression and degree of EMT in CTCs
设定HER2荧光信号强度阈值56（基于NUGC4与KATOIII细胞系校准），B组患者CTC HER2信号强度中位133（82-193），显著高于阴性组（中位44）。EMT指数计算显示HER2阳性CTC与EMT进程显著正相关（r=0.765, p<0.001），且A'组（组织阳性）与B组EMT指数均高于C组（p=0.05 vs p=0.005）。

Comparison of progression free survival between the three groups
生存分析揭示惊人差异：A组（组织阳性+靶向治疗）中位PFS 15.7个月，B组（仅CTC阳性）仅7.0个月，C组（双阴性）未达到（p=0.012）。B组较C组更差的预后强烈提示，CTC HER2阳性患者可能因未接受靶向治疗而错失生存获益机会。

Comparison of genomic profiles between the three groups
基因组分析发现A、B组共享PIK3CA、ARID1A等EMT相关突变，而C组突变负荷最低（中位4 vs 7/6.5）。特别值得注意的是，B组特有的TP53、CCND1突变与EMT机制相关，从分子层面解释了该组侵袭性表型。

这项研究开创性地证实，CTC实时监测能克服组织活检的局限性，动态反映肿瘤生物学特征。尤其对于组织HER2阴性但CTC阳性患者（占本队列29.6%），其EMT特征、基因突变谱与HER2阳性患者高度相似，却因现行诊疗标准无法接受靶向治疗，导致预后显著恶化。该发现为修订胃癌HER2靶向治疗指南提供了强有力证据，建议将CTC检测纳入临床决策流程。未来需开展前瞻性研究验证CTC指导的靶向治疗能否改善B组患者生存，并探索HER2抗体偶联药物(ADC)在此人群的应用潜力。