复方斑蝥胶囊通过多组学分析揭示其调控CDK1/2靶点治疗弥漫大B细胞淋巴瘤的机制

本研究针对弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)治疗耐药难题，通过多组学整合与实验验证揭示了传统中药复方斑蝥胶囊(CMC)的关键活性成分β-谷甾醇通过调控CDK1/2等靶点抑制肿瘤的分子机制。研究人员结合GSE32018和TCGA数据库分析、单细胞测序及网络药理学，发现CMC通过干预细胞周期和p53信号通路显著抑制DLBCL进展，体外实验证实β-谷甾醇可诱导肿瘤细胞凋亡。该研究为中药抗淋巴瘤提供了新靶点和理论依据，发表于《Scientific Reports》。

　　

弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)作为非霍奇金淋巴瘤最常见的亚型，约占全部病例的30%，其临床治疗面临严峻挑战。尽管靶向治疗使部分患者获得缓解，但高达40%的患者会出现耐药，导致生存率急剧下降。传统化疗方案伴随的毒副作用和肿瘤异质性，使得寻找高效低毒的新型治疗策略成为当务之急。近年来，具有多靶点作用特点的中药复方在肿瘤治疗中展现出独特优势，其中复方斑蝥胶囊(CMC)已广泛应用于肝癌、肺癌等恶性肿瘤治疗，但其抗DLBCL机制尚未阐明。

新疆医科大学附属肿瘤医院病理科王灿灿团队联合多家医疗机构，通过整合转录组学、单细胞测序和网络药理学技术，首次系统解析了CMC治疗DLBCL的科学依据。研究从GSE32018和TCGA数据库筛选出943个DLBCL关键基因，结合CMC的1053个预测靶点，锁定50个交叉靶点。通过构建"药物-成分-靶点"网络，发现β-谷甾醇(sitosterol)和3'-甲氧基光甘草定(3'-Methoxyglabridin)是CMC中抗DLBCL的核心成分。

研究采用的主要技术包括：1)基于GEO和TCGA数据库的差异表达基因分析；2)加权基因共表达网络分析(WGCNA)鉴定关键模块；3)单细胞RNA测序解析靶点细胞定位；4)分子对接与动力学模拟验证结合活性；5)CCK-8和流式细胞术检测体外药效。

数据挖掘与靶点筛选
通过分析22例DLBCL与7例反应性淋巴组织增生(RLH)样本，鉴定出2417个差异基因。WGCNA显示MEbrown模块与DLBCL表型相关性最强(r=0.65)，该模块基因显著富集于MYC靶点、G2M检查点等通路。CMC的11味中药共筛选出247种活性成分，其中β-谷甾醇以最高连接度(Degree=56)成为关键成分。

作用机制解析
GO分析显示CMC靶点主要调控细胞周期G1/S期转换(调整P=3.74×10^-11)，KEGG提示其通过p53信号通路(P=1.02×10^-5)和PI3K-Akt通路发挥作用。单细胞测序证实这些靶点在DLBCL肿瘤细胞亚群特异性高表达，与B细胞标志基因CD19、CD20共定位。

关键靶点验证
蛋白互作网络筛选出CDK1、CDK2、TOP2A等核心靶点，其在DLBCL组织中表达量较正常组织升高2-3倍(P<0.001)。ROC曲线显示CDK1(AUC=0.92)和CDK2(AUC=0.89)具有优异诊断价值。生存分析证实这些靶点高表达患者5年生存率降低40%(HR=2.1, P=0.003)。

分子相互作用
分子对接显示β-谷甾醇与CDK1结合能达-7.6 kcal/mol，形成稳定氢键网络。100 ns分子动力学模拟证实3'-甲氧基光甘草定/CDK1复合物RMSD波动仅3?，结构最为稳定。体外实验验证β-谷甾醇可剂量依赖性抑制DLBCL细胞增殖，在Pfeiffer和U2932细胞系中的IC₅₀分别为14 ng/mL和6 ng/mL。

该研究创新性地揭示了CMC通过多成分协同调控细胞周期核心靶点的作用机制，特别是阐明了β-谷甾醇作为天然CDK抑制剂的治疗潜力。研究不仅为中药现代化研究提供了范式，更重要的是为克服DLBCL耐药难题提供了新思路——靶向CDK1/2的联合治疗方案可能改善患者预后。未来需进一步开展CMC成分的体内药代动力学研究，并探索其与传统化疗的协同效应。