mfpA突变对副溶血性弧菌运动性和生物被膜形成的影响

　　 摘要:

膜融合蛋白(membrane fusion protein, MFP) vpa1443-vpa1445基因簇(mfpABC)推测可能参与副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus, Vp)生物被膜的形成，其中mfpA (vpa1445)编码一种含RTX毒素样结构域的Ca²⁺结合膜外蛋白，但其功能尚未明确。目的 探究mfpA突变对Vp生物被膜形成和运动性的影响。方法 分别构建mfpABC基因簇中3个基因的单突变菌株，比较3个突变株运动性的变化；在此基础上，重点分析mfpA对细菌运动能力和生物被膜形成能力的影响，通过RT-qPCR分析相关基因的表达，并探究其对HeLa细胞毒性的影响。结果 mfpA突变可显著降低Vp的浮游(swimming)和群聚(swarming)运动能力；结晶紫染色和扫描电镜试验表明，ΔmfpA突变可提高菌株生物被膜的形成能力，并增加突变株胞外多糖和胞外蛋白的含量；RT-qPCR证实，ΔmfpA突变株中鞭毛相关基因的表达量下降，而胞外多糖合成相关基因的表达量上升；此外，ΔmfpA突变株可显著减弱Vp的细胞毒性。结论 mfpA突变可通过影响鞭毛和胞外多糖相关基因的表达，降低Vp的运动能力，提高生物被膜的形成能力，削弱其细胞毒性。