一种聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)水解新酶的挖掘与酶学性质分析

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目的 聚对苯二甲酸乙二醇酯(polyethylene terephthalate, PET)的生物酶法解聚是通过PET水解酶催化PET水解，得到终产物对苯二甲酸和乙二醇。通过基因挖掘获得新的PET水解酶，可为废弃PET的生物酶法解聚提供可用于分子改造的蛋白。方法 通过基因挖掘的方法发现来源于Alkalilimnicola ehrlichii的未知功能蛋白(命名为AePETase)具有水解无定形PET膜的活性，并对AePETase进行异源表达、纯化和酶学性质研究。结果 确定了AePETase的T_m值为(53.0±0.7) ℃，最适反应温度为45 ℃，最适缓冲液体系为Na₂HPO₄-NaH₂PO₄ (100 mmol/L, pH 8.0)，较合适的酶浓度为1.0 μmol/L以内。在45 ℃条件下，无定形PET膜的水解产物量为已报道的IsPETase的13.4倍(72 h)。结论 AePETase对PET具有较好的水解活性，是一种具有较大潜力的PET水解新酶。