加味四妙勇安汤通过DDAH/ADMA/NO通路改善急性冠脉综合征内皮功能的整合多组学研究

本研究针对急性冠脉综合征（ACS）治疗中存在的再狭窄、微循环障碍和耐药性问题，通过整合化学组分分析、转录组学和网络药理学技术，首次揭示加味四妙勇安汤（HJ11）通过调控DDAH/ADMA/NO通路改善内皮功能的核心机制。研究发现HJ11中212种化学成分中的49种血中移行成分（包括有机酸和黄酮类）可显著降低炎症因子（TNF-α、IL-6）和氧化应激水平，并通过上调DDAH2、抑制PRMT1表达，有效恢复内皮型一氧化氮合酶（eNOS）活性和NO生物利用度。该研究为中药复方治疗心血管疾病提供了多靶点作用机制的科学依据，发表于《Phytomedicine》。

　　

破解急性冠脉综合征治疗困境：中药复方多靶点调控机制揭秘

急性冠脉综合征（ACS）作为冠心病最凶险的类型，尽管现代医学采用抗血小板、他汀类药物及介入治疗，仍面临再狭窄、微循环障碍和耐药性等临床挑战。传统中药复方在心血管疾病治疗中展现独特优势，其中加味四妙勇安汤（HJ11）源自经典方剂四妙勇安汤，前期研究证实其能改善ACS模型大鼠心功能和炎症反应，但其作用靶点与分子机制尚未阐明。

中国中医科学院团队在《Phytomedicine》发表的最新研究，首次通过整合多组学技术揭示HJ11治疗ACS的科学内涵。研究人员采用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱（UPLC-QE-Orbitrap-MS）鉴定出HJ11煎液的212种化学成分，其中49种为血中移行成分（包括有机酸、黄酮类和氨基酸）。结合ACS大鼠心肌组织转录组测序与网络药理学分析，发现HJ11通过调节炎症反应、氧化应激及DDAH/ADMA/NO通路发挥治疗作用。实验验证表明，该复方可显著降低不对称二甲基精氨酸（ADMA）水平，提升一氧化氮（NO）生物利用度，其机制涉及下调蛋白精氨酸甲基转移酶（PRMT）表达、上调二甲基精氨酸二甲胺水解酶（DDAH）活性。

关键技术方法

研究团队采用三重技术路线：1）通过UPLC-QE-Orbitrap-MS进行化学成分谱分析，结合大鼠血清药物化学鉴定血中移行成分及代谢产物；2）基于SD大鼠左冠状动脉前降支结扎ACS模型（n=32），采用28天灌胃给药进行在体验证；3）整合转录组测序（心肌组织RNA-seq）与网络药理学（TCMSP、GeneCards数据库），构建化合物-靶点-通路网络；4）体外采用脂多糖（LPS）诱导人脐静脉内皮细胞（HUVEC）损伤模型，通过ELISA、免疫荧光等技术验证关键通路。

核心研究发现

化学成分与代谢特征
• UPLC-QE-Orbitrap-MS鉴定出黄酮类（如槲皮素）、有机酸（如绿原酸）等212种成分，其中49种血中移行成分主要经II相代谢（如槲皮素-3-葡萄糖醛酸苷）
• HPLC定量显示君药金银花中绿原酸含量0.39%，总酚酸0.57%，符合《中国药典》标准

多组学整合机制预测
• 转录组分析发现HJ11干预后1583个基因下调（包括TNF、NF-κB）、73个基因上调
• 网络药理学筛选229个交集靶点，富集分析显示主要涉及：

• 脂质与动脉粥样硬化通路（P<0.05）
• PI3K-Akt信号通路
• 炎症反应（TNF/IL-17信号）

DDAH/ADMA/NO通路验证
• 动物实验：HJ11组血清ADMA降低38.7%（P<0.01），NO提升2.1倍（P<0.01）
• 基因调控：显著下调PRMT1表达（P<0.05），上调DDAH2、AGXT2和eNOS mRNA
• 蛋白表达：Western blot证实DDAH2蛋白增加1.8倍（P<0.05），PRMT1降低32%

抗炎与抗氧化效应
• 细胞模型：HJ11（25μg/mL）使LPS诱导的TNF-α、IL-6降低41.3%-53.7%（P<0.01）
• 活性氧（ROS）清除：HJ11中剂量组荧光强度降低67%（P<0.01）
• 内皮保护：改善LPS诱导的HUVEC存活率（CCK8法验证，P<0.05）

科学价值与临床意义

本研究首次阐明HJ11通过"多成分-多靶点-多通路"协同作用治疗ACS的机制：1）黄酮类成分通过抑制PRMT1减少ADMA合成；2）有机酸成分激活DDAH2增强ADMA代谢；3）协同提升eNOS活性和NO生物利用度，改善内皮功能障碍。值得注意的是，在等效剂量下，HJ11降低ADMA的效果与他汀类药物相当，且18g/kg的急毒实验显示安全性良好（Zhao et al., 2023）。

该研究突破传统单靶点药物研发模式，通过整合化学组学-转录组学-网络药理学技术平台，为中药复方机制研究提供范式。特别是发现DDAH/ADMA/NO这一非经典通路在心血管疾病中的作用，为ACS治疗提供了新靶点。研究揭示的槲皮素葡萄糖醛酸苷等活性代谢产物，也为中药药效物质基础研究提供新方向。

中国中医科学院团队此项工作，不仅证实传统中药"活血清热"理论的科学内涵，更推动中医药在心血管精准治疗领域的发展。未来需进一步开展HJ11主要活性成分的药代动力学研究，并通过基因敲除等技术验证核心靶点，为中药复方新药研发奠定基础。