硅酸盐刺激鹿茸储备间充质细胞来源的细胞外囊泡通过抑制异常血管生成和凋亡缓解糖尿病肾病肾损伤

本研究创新性利用硅酸盐离子（SiO32?）刺激鹿茸储备间充质细胞（RM cells）分泌富含miR-148a-3p的细胞外囊泡（Si-RM-EVs），显著提升EVs产量（6.4倍）并增强其生物活性。动物实验证实Si-RM-EVs通过双重调控机制——靶向抑制VEGFA（血管内皮生长因子A）和BCL2L11（促凋亡蛋白）表达，同步改善糖尿病肾病（DN）小鼠的异常血管生成（基底膜厚度减少42%）和肾细胞凋亡（TUNEL阳性细胞降低58%），为DN治疗提供了兼具抗纤维化与血管稳态调节功能的新型无细胞疗法。

　　

硅酸盐刺激鹿茸RM细胞来源EVs的制备与表征
研究团队通过化学共沉淀法合成钙硅酸盐（CS）粉末，经SEM-EDS确认其主要成分为O、Si、Ca。采用1:16稀释的SiO₃^2?溶液刺激鹿茸储备间充质细胞（RM cells）后，通过超速离心获得Si-RM-EVs。纳米流式检测显示其浓度达63.2×10¹⁰ particles/mL，较普通RM-EVs提升6.4倍。TEM显示典型杯状结构，Western blot验证TSG101、CD81、CD63等EV标志物表达。

miRNA测序揭示关键功能分子
高通量测序发现Si-RM-EVs中75种miRNA显著上调，其中miR-148a-3p占比达43%。RNAhybrid预测其与VEGFA、BCL2L11存在结合位点，双荧光素酶实验证实相互作用。GO分析显示靶基因富集于外泌作用、血管生成正调控和凋亡信号通路，提示其多重修复潜能。

DN小鼠模型的治疗效应
在STZ诱导的DN模型中，Si-RM-EVs治疗组呈现：

• 生理指标：尿蛋白降低67%，肌酐清除率提升2.1倍
• 血管病理：PAS染色显示肾小管基底膜厚度减少42%，CD31免疫组化证实血管周围细胞浸润减少
• 凋亡调控：TUNEL阳性细胞减少58%，Caspase 3蛋白表达下降45%
• 线粒体保护：TEM观察到肾小管上皮细胞微绒毛排列接近正常组

体外机制验证
高糖培养的HUVEC细胞实验中：

• 功能实验：Si-RM-EVs使血管形成数减少72%，划痕愈合率降低54%
• 挽救实验：抑制miR-148a-3p后上述效应被逆转
• 分子机制：miR-148a-3p过表达使VEGFA和BCL2L11蛋白分别下调61%和53%

双向调节的独特优势
相较于传统MSC-EVs，Si-RM-EVs展现特异性调控：

• 对异常血管：抑制过度表达的VEGFA（-48%）
• 对正常血管：无显著影响
  这种双向调节特性源于鹿茸RM细胞固有的血管稳态调控能力，经SiO₃^2?刺激后通过miR-148a-3p的剂量依赖性作用实现精准干预。

临床转化潜力
该研究突破现有DN治疗中抗凋亡与抗血管生成难以并行的困境，建立SiO₃^2?-RM细胞EVs工程化平台，单次治疗所需细胞量减少84%。未来可拓展至其他血管异常相关疾病，如糖尿病视网膜病变或肿瘤微环境调控。