2020-2023年WHO欧洲区域实验室呼吸道合胞病毒分子检测质量评估：疫苗时代下的诊断效能分析

本研究针对呼吸道合胞病毒(RSV)诊断质量参差问题，通过分析2020-2023年QCMD外部质量评估(EQA)数据，评估了WHO欧洲区域67家实验室对RSV-A/B的NAATs检测效能。结果显示：核心样本正确率高达96.8-100%，商业检测占比63.5-82%，为疫苗与抗体疗法时代的诊断标准化提供关键基准。

　　

呼吸道合胞病毒(Respiratory Syncytial Virus, RSV)作为婴幼儿下呼吸道感染的主要病原体，每年导致全球超3000万例患儿感染。尽管多数症状轻微，但对婴儿和老年人可能致命。随着SARS-CoV-2大流行后呼吸道检测激增，以及2023年多款RSV疫苗和单抗药物（如针对F蛋白的Nirsevimab）获批，精准诊断的需求空前迫切。然而，诊断实验室面临商业试剂与自建方法(in-house assays)并存、检测敏感性差异等挑战，亟需系统性质量评估。

荷兰国家公共卫生与环境研究所(RIVM)联合国际团队，在《Journal of Clinical Virology》发表了首个跨年度大规模RSV诊断质量研究。团队分析了Quality Control for Molecular Diagnostics(QCMD)2020-2023年来自21国67家实验室的807份数据集，采用Clopper-Pearson 95%置信区间统计，比较了商业试剂(如Cepheid GeneXpert)与自建方法对RSV-A/B核心样本(core samples)和教育样本(educational samples)的检测差异。

关键技术包括：1) 使用QCMD统一提供的冻存临床样本，保持毒株(RSV-A/B)和浓度四年恒定；2) 通过ITEMS系统收集实验室提取平台(如bioMérieux Biofire)、扩增靶点等元数据；3) 采用双盲设计评估核心样本(临床相关浓度)与教育样本(低浓度挑战)的检出率。

主要结果：

1. 核心样本表现卓越
   2020-2023年RSV-A核心样本正确率96.8-99.2%，RSV-B达96.0-100%。2021年商业试剂对RSV-A检出率短暂下降至95.6%，可能与COVID-19检测挤占资源有关。

2. 教育样本揭示灵敏度差异
   低浓度样本中，自建方法对RSV-B检出率持续低于商业试剂(如2020年仅84.77%)，提示部分实验室需优化灵敏度。

3. 商业试剂主导市场
   Cepheid(28.4%)、Seegene(7.0%)等商业试剂占比超63.5%，但不同厂商间核心样本性能无统计学差异(p>0.05)。

4. 阴性样本特异性优异
   所有年份阴性样本正确率97.3-100%，假阳性风险极低。

讨论指出，尽管WHO欧洲区域整体诊断质量优异，但需警惕三个趋势：1) 疫苗普及可能引发抗原漂移，需更新EQA毒株库；2) IVDR法规或限制自建方法使用；3) 多病原体联检试剂(如Xpert Xpress CoV-2/Flu/RSV plus)的交叉反应需持续监控。该研究为全球RSV诊断标准化提供了基线数据，尤其对监测疫苗时代病毒变异具有里程碑意义。