CD226基因修饰的iPSC来源NK细胞：攻克急性髓系白血病免疫治疗新策略

本研究针对急性髓系白血病(AML)免疫逃逸机制，通过诱导多能干细胞(iPSC)分化体系构建CD226过表达的自然杀伤细胞(OE226-iNK)，显著提升对AML细胞的杀伤效能。研究发现工程化iNK细胞通过激活PI3K-Akt通路增强颗粒酶B(GZMB)释放，在低效靶比下实现91.2%的AML细胞清除率，小鼠模型显示治疗组中位生存期延长10.5天。该研究为标准化"现货型"细胞疗法提供了新思路。

　　

在血液肿瘤治疗领域，急性髓系白血病(AML)始终是临床治疗的难点。尽管自然杀伤细胞(NK)疗法展现出良好前景，但肿瘤微环境诱导的CD226受体下调严重制约了疗效。更棘手的是，传统NK-92细胞系因需辐照处理而活性受限，个体化制备的NK细胞又存在批次差异大等问题。这些瓶颈促使科学家们寻找更优解决方案。

北京大学等机构的研究团队创新性地将目光投向诱导多能干细胞(iPSC)技术平台。通过PiggyBac转座子系统构建CD226过表达的iPSC细胞系(OE226-iPSCs)，经4周定向分化获得工程化NK细胞。研究采用转录组测序、多色流式、ELISA等技术，结合THP1-GL细胞系构建的AML异种移植模型，系统评估了治疗效能。论文最终发表在《Experimental Hematology》期刊，为标准化细胞治疗产品开发提供了重要依据。

关键技术方法包括：1) PiggyBac转座子系统实现CD226稳定过表达；2) 四阶段iPSC定向分化 protocol获取CD56⁺CD226⁺ iNK细胞；3) 生物发光成像(BLI)动态监测NPG小鼠肿瘤负荷；4) 液相芯片技术检测22种细胞因子分泌谱；5) RNA-seq结合GSEA分析揭示PI3K-Akt通路激活机制。

CD226-overexpressing iPSC-derived NK cells exhibit enhanced cytotoxicity and immune activation
研究团队首先证实OE226-iPSCs能正常分化为CD34⁺CD226⁺造血内皮细胞，最终获得表达NKp46、NKG2D等典型标志物的iNK细胞。在效靶比1:1时，OE226-iNK对THP1细胞的杀伤率较对照组提升2.3倍，颗粒酶B(GZMB)分泌量增加4.8倍。转录组分析显示TNF超家族基因集显著富集，NOD样受体通路激活评分达NES=2.15。

CD226-overexpressing iNK cells suppress AML progression and prolong survival in vivo
在AML小鼠模型中，3×10⁵个OE226-iNK细胞即展现出优于1×10⁶个对照细胞的治疗效果。治疗组第42天BLI信号强度降低87%，血清IL-6水平下降至156 pg/mL，中位生存期延长至48天。值得注意的是，低剂量治疗组系统性炎症指标反而优于高剂量对照组，提示CD226修饰可能改善细胞因子释放综合征(CRS)风险。

该研究开创性地将干细胞工程与免疫受体编辑相结合，证实CD226过表达能协同提升iNK细胞的直接杀伤与免疫调节功能。特别值得注意的是，在低效靶比条件下仍保持强劲活性，这对解决临床效应细胞数量不足的难题具有重要价值。虽然研究暂未涉及PDX模型验证，但为开发通用型细胞疗法提供了关键技术支撑。未来可进一步探索CD226与TIGIT的配体竞争机制，以及该策略在CD155⁺实体瘤中的应用潜力。