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商业化血清学检测技术在绵羊血吸虫病诊断中的应用与评价
【字体: 大 中 小 】 时间:2025年07月08日 来源:Veterinary Parasitology 2.0
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为解决动物血吸虫病诊断技术不足的问题,研究人员评估了两种商业化人用血清学检测方法(ELISA和Western Blot)在绵羊模型中的适用性。通过实验感染35只绵羊(含S. haematobium、S. bovis及其杂交株),发现调整检测方案后两种方法均能有效识别感染,与尸检成虫回收率一致性高(Kappa系数0.62-0.64)。该研究为动物宿主筛查提供了标准化工具,对实现WHO 2030年消除血吸虫病目标具有重要意义。
血吸虫病作为一种被忽视的热带病,长期威胁着全球3亿人口的健康,其中半数以上是学龄儿童。更棘手的是,这种疾病并非人类专属——野生动物和家畜作为保虫宿主,在人类大规模治疗地区仍维持着寄生虫的传播链,可能让防控努力功亏一篑。特别是在非洲等流行区,不同血吸虫物种间的杂交现象日益普遍,这些杂交后代可能具有更强的感染能力和更广的宿主范围。然而当前动物诊断技术发展滞后,成为实现世界卫生组织(WHO)2030年消除目标的主要障碍。
法国国家兽医学校等机构的研究团队独辟蹊径,尝试将两种商业化人用血清学检测技术"移植"到动物诊断领域。他们选取了35只实验感染绵羊作为模型,这些动物分别暴露于S. haematobium、S. bovis以及它们的杂交株(包括第一代和第二代回交株)。研究人员巧妙调整检测方案,用抗绵羊IgG抗体替代原有试剂中的结合物,使本用于人类的ELISA和Western Blot(WB)技术成功"跨界"应用。这项创新研究近期发表在《Veterinary Parasitology》上,为动物血吸虫病的标准化诊断提供了新思路。
研究采用三大关键技术:首先建立包含175份血清的样本库(来自35只绵羊的5次纵向采样);其次改良商业ELISA试剂盒(Bordier公司)和WB试剂盒(LDBio公司)的检测流程;最后通过成虫回收率验证诊断效果,并采用Kappa系数评估方法间一致性。
【3.1 成虫回收】尸检发现所有寄生虫均定植于消化道周围血管,膀胱未见感染。纯种S. haematobium不能感染绵羊,而其与S. bovis的杂交株均具感染性,其中S. bovis回交株感染度显著更高。
【3.2 ELISA检测】调整后的ELISA在第5次采样时灵敏度达100%,特异性83.3%。有趣的是,S. haematobium回交株感染羊的吸光度值普遍较低,提示抗原兼容性差异。抗体产生存在"时间窗"现象——最早在感染后29-50天可检出。
【3.3 WB检测】WB展现出100%的灵敏度,但特异性仅50%。所有阳性样本均出现P22-24条带,而S. bovis及其杂交株还额外呈现P30-34条带,揭示S. bovis与S. mansoni存在抗原交叉反应。
【3.4 方法一致性】ELISA与WB的Kappa值为0.48,两者与尸检结果的Kappa值分别为0.64和0.62,显示中等至高度一致性。
这项研究首次证实商业化人用诊断试剂经改良后可用于动物检测,具有三大突破性意义:其一,为动物宿主筛查提供标准化工具,填补了血吸虫病"一体化防控"的关键技术空白;其二,发现S. bovis杂交株更强的致病性,提示其在传播中的特殊地位;其三,揭示抗原交叉反应规律,为多宿主诊断试剂的开发奠定基础。
特别值得注意的是,WB检测中出现的"假阳性"可能反映尸检法的灵敏度局限——那些未检出成虫却呈现弱阳性条带的样本,或许提示早期感染或低水平感染。研究人员建议未来结合等温扩增等分子技术,建立更适合现场应用的诊断流程。这项"跨界"创新不仅为兽医寄生虫学提供新工具,更为实现WHO 2030年消除血吸虫病的目标提供了关键技术支撑。
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