基于p53信号通路介导DNA损伤的番荔枝内酯协同卡铂抗卵巢癌作用及机制研究

本研究针对卵巢癌(OC)晚期诊断率高、卡铂化疗后复发耐药严重的临床困境，首次系统探究番荔枝活性成分annonacin通过激活p53信号通路诱导DNA损伤的抗OC作用及其与卡铂的协同机制。体外实验证实annonacin可显著抑制OC细胞增殖(IC50 10.21-15.12 μM)、阻滞细胞周期并诱导衰老，体内实验显示其联合卡铂具有显著抑瘤效果且生物安全性良好，为克服OC化疗耐药提供了新型植物药联合治疗方案。

　　

卵巢癌作为女性生殖系统致死率最高的恶性肿瘤，约70%患者确诊时已届晚期。尽管卡铂等铂类药物是临床一线化疗方案，但耐药复发和骨髓抑制等副作用严重制约疗效。传统植物药番荔枝(Asimina triloba)在民间抗癌应用历史悠久，其活性成分annonacin虽在乳腺癌等领域展现抗癌潜力，但针对卵巢癌的作用机制尚属空白。温州医科大学团队在《Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Molecular Basis of Disease》发表的研究，首次揭示annonacin通过p53介导的DNA损伤途径实现抗OC及化疗增敏的双重功效。

研究采用RP-HPLC从番荔枝果实提取纯化annonacin，通过MTT法测定细胞毒性，EdU染色评估DNA复制，Transwell实验分析迁移侵袭，流式细胞术检测周期阻滞，SA-β-gal染色观察衰老，γ-H2AX免疫荧光标记DNA损伤，Western blot验证p53通路蛋白表达，并建立小鼠移植瘤模型验证体内效果。

【Annonacin inhibits ovarian cancer cell proliferation and induces cell senescence】
MTT实验显示annonacin对OC细胞(A2780/ES2)的IC₅₀显著低于正常细胞(IOSE-80/MIHA)。2.5-10 μM浓度可剂量依赖性抑制EdU掺入率(下降37.6-82.3%)，G0/G1期细胞比例增加1.8-2.4倍，SA-β-gal阳性细胞率提升3.1-5.7倍，证实其通过阻滞周期和诱导衰老抑制增殖。

【Annonacin reduces OC cell-matrix adhesion and suppresses migration and invasion】
Transwell实验表明5 μM annonacin使A2780细胞迁移数减少62.4%，侵袭数降低71.8%。整合素β1和FAK蛋白表达下调50%以上，提示其通过干扰细胞-基质粘附抑制转移。

【Synergistic effect of annonacin with carboplatin】
CompuSyn分析显示联合指数(CI)为0.32-0.45，γ-H2AX焦点数增加3.2倍。Western blot显示p53/p21通路激活，CHK1/2磷酸化水平升高，证实DNA损伤反应增强是协同增效的核心机制。

【In vivo antitumor activity and safety】
小鼠模型显示annonacin(10 mg/kg)单用抑瘤率达48.6%，联合卡铂提升至72.3%，且未引起肝肾功能异常或骨髓抑制，急性毒性实验LD₅₀>2000 mg/kg。

该研究创新性揭示annonacin通过p53依赖的DNA损伤途径实现抗OC三重机制：直接抑制增殖、阻断转移、增强铂类敏感性。特别值得注意的是，其对正常细胞的较低毒性(IC₅₀ 15.48-28.92 μM)与高纯度提取工艺(经¹H/¹³C NMR验证)为临床转化奠定基础。研究不仅为植物活性成分抗肿瘤机制提供新证据，更为克服OC化疗耐药这一世界性难题提供了"天然药物-化疗药"联合治疗范式，具有重要转化医学价值。