德国洋甘菊酵母双杂交cDNA文库构建及McHDRa/b互作蛋白鉴定研究

来自国内的研究人员针对德国洋甘菊(Matricaria chamomilla L.)基因组数据缺失、蛋白互作机制不明的问题，首次构建了高效均质化酵母cDNA文库（滴度1.444×108 CFU/mL，插入片段>1,000 bp），通过Y2H和BiFC技术验证了MEP途径末端酶HDS与HDRa/b的互作关系，揭示了其调控(E)-β-法尼烯合成的分子机制，为解析倍半萜合成蛋白网络奠定基础。

　　

德国洋甘菊(Matricaria chamomilla L.)作为传统芳香药用植物，其花朵富含具有药用价值的倍半萜类物质，包括(E)-β-法尼烯((E)-β-farnesene)、母菊薁(chamazulene)和α-红没药醇(α-bisabolol)。由于该物种基因组数据空白，科研团队突破性地构建了首个均质化酵母cDNA文库——文库滴度达1.444×10⁸ CFU/mL，阳性率100%，插入片段突破1,000 bp大关。

研究聚焦甲基赤藓糖醇-4-磷酸途径(MEP pathway)关键酶：1-羟基-2-甲基-2-(E)-丁烯基-4-二磷酸合成酶(HDS)与还原酶(HDR)的互作机制。通过酵母双杂交(Y2H)和双分子荧光互补(BiFC)双验证体系，首次捕获McHDS与McHDRa/b的相互作用。进一步分析显示，这对"代谢搭档"可能通过协同作用调控(E)-β-法尼烯的生物合成。

该研究不仅填补了德国洋甘菊分子工具库的空白，更揭示了倍半萜合成途径中精妙的蛋白协作网络，为开发高附加值萜类化合物提供了新靶点。