CTHRC1通过TNFSF9-TNFRSF9轴调控M2型肿瘤相关巨噬细胞极化促进肾母细胞瘤进展的机制研究

本研究针对肾母细胞瘤(WT)微环境中免疫逃逸机制不明的问题，通过多组学分析揭示了胶原三螺旋重复蛋白1(CTHRC1)通过TNFSF9-TNFRSF9信号轴驱动M2型肿瘤相关巨噬细胞(M2-TAMs)极化，进而激活PI3K/Akt通路促进肿瘤恶性进展的分子机制。研究发现为WT免疫治疗提供了新靶点，具有重要转化价值。

　　

肾母细胞瘤(WT)作为儿童最常见的肾脏恶性肿瘤，尽管综合治疗使5年生存率超过90%，但约25%患者仍面临复发转移的困境，其预后生存率骤降至30%。这一临床难题背后，肿瘤微环境(TME)的免疫抑制特性日益受到关注，尤其是具有促瘤作用的M2型肿瘤相关巨噬细胞(M2-TAMs)在WT中的调控机制尚不明确。贵州医科大学附属医院的研究团队在《Journal of Translational Medicine》发表的研究，首次系统揭示了胶原三螺旋重复蛋白1(CTHRC1)通过TNFSF9-TNFRSF9-PI3K/Akt信号轴驱动M2-TAMs极化并促进WT进展的双向调控机制。

研究采用生物信息学分析、单细胞测序、免疫组化等技术验证了CTHRC1与M2-TAMs在WT组织的共定位特征；通过构建CTHRC1敲低/过表达细胞模型和裸鼠移植瘤模型，结合转录组测序筛选出关键信号通路；采用中和抗体阻断实验和共定位分析明确了TNFSF9-TNFRSF9轴的桥梁作用；最后通过PI3K抑制剂LY294002验证了M2-TAMs通过PI3K/Akt通路促进肿瘤恶性行为的机制。

研究结果显示：

1. 生物信息学分析揭示CTHRC1与M2-TAMs的正相关性
   通过TARGET、GSE73209等数据库分析发现，WT组织中CTHRC1表达量是正常组织的3倍，且与M2标记物CD163/CD206呈显著正相关（R=0.45，P<0.05）。单细胞测序显示CTHRC1在肿瘤浸润巨噬细胞中特异性高表达。

1. CTHRC1促进WT细胞恶性表型
   过表达CTHRC1使SK-NEP-1细胞S期比例从32.24%增至43.24%（P<0.0001），凋亡率降低25%；而敲除CTHRC1导致G₀/G₁期阻滞（68.78% vs 53.32%）和凋亡增加3倍。

2. TNFSF9-TNFRSF9轴介导M2极化
   转录组分析发现CTHRC1上调TNFSF9表达4.5倍（P<0.01），ELISA显示其分泌量增加2.3倍。免疫荧光证实TNFSF9与M2-TAMs膜受体TNFRSF9共定位，中和抗体可阻断80%的M2极化效应。

3. M2-TAMs通过PI3K/Akt反馈促进肿瘤
   共培养实验显示M2-TAMs使WT细胞p-Akt水平升高2.1倍（P<0.001），抑制剂LY294002可逆转其促增殖作用，使凋亡率从2.87%恢复至5.00%。

该研究创新性提出"CTHRC1-TNFSF9/TNFRSF9-PI3K/Akt"正反馈环路模型：肿瘤源CTHRC1通过旁分泌TNFSF9激活M2-TAMs的TNFRSF9受体，极化后的M2-TAMs又通过PI3K/Akt通路促进肿瘤进展。这一发现不仅解释了WT微环境免疫抑制的成因，更为联合靶向CTHRC1和免疫检查点的精准治疗提供了理论依据。研究采用的跨尺度验证策略——从单细胞测序到动物模型的多维度分析，为肿瘤-免疫互作研究提供了方法论参考。

值得注意的是，CTHRC1作为分泌蛋白可能通过表观遗传修饰影响WT相关基因，而TNFSF9/TNFRSF9轴在T细胞耗竭中的双重作用提示临床转化需谨慎。未来研究可探索CTHRC1抑制剂与PD-1阻断的协同效应，或通过监测外周血CD163⁺/CD206⁺单核细胞动态评估治疗响应，这些方向均具有重要转化潜力。