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全球变暖加剧了热胁迫与土传病害(如根腐病)对作物的协同危害。云南农业大学联合中国农业大学团队通过多组学技术,首次揭示三七(Panax notoginseng)在36°C热胁迫下通过增强核苷酸代谢分泌嘌呤(如腺嘌呤)和嘧啶类物质,特异性招募根际有益微生物伯克霍尔德菌(Burkholderia sp. B36)和酵母菌(Saitozyma podzolica SP)。这些微生物通过拮抗病原菌(如Fusarium solani)和激活植物抗氧化酶(SOD/POD)双重机制,提升宿主耐热性并降低根腐病发生率。该研究为利用“植物益生元(核苷酸)”调控根际微生态以应对多重胁迫提供了新思路,发表于《Microbiome》。
论文解读
在全球气候变暖背景下,高温胁迫不仅直接损伤作物生长,还会削弱植物免疫系统,加剧土传病原体(如根腐病菌)的危害。药用植物三七作为典型阴生作物,对高温高度敏感,其种植常因连作障碍导致土壤病原体富集,形成“负反馈循环”。传统植物根际促生菌(PGPR)应用常因定殖效率低和效果不稳定受限。因此,探索植物自身在胁迫下招募有益微生物的机制,对开发绿色防控策略至关重要。
云南农业大学、中国农业大学等机构的研究团队通过多组学联用技术,发现三七在36°C热胁迫下通过根系分泌核苷酸类物质,特异性富集有益根际微生物,协同增强宿主耐热性与根腐病抗性。相关成果发表于《Microbiome》。
研究方法的核心技术
- 温度梯度实验:三七幼苗在20°C、24°C、28°C、32°C、36°C(昼/夜9h/15h)下处理15天,收集根际土壤。
- 植物-土壤反馈评价:热处理土壤经灭菌/非灭菌处理后种植新三七幼苗,统计存活率及根腐病发生率。
- 多组学分析:
- 宏基因组测序(16S rRNA/ITS)解析微生物群落结构;
- 非靶向代谢组学(UPLC-ESI-MS/MS)鉴定根系分泌物;
- 转录组测序(Illumina HiSeq 2500)筛选核心代谢通路基因。
- 功能验证:
- 分离关键微生物(伯克霍尔德菌B36、酵母菌SP),平板对峙实验验证其拮抗病原菌能力;
- 外源核苷酸(嘌呤/嘧啶混合物)添加实验验证微生物富集效应;
- 辣椒(Capsicum annuum)和番茄(Solanum lycopersicum)跨物种验证微生物-核苷酸协同抗逆效果。
研究结果与发现
1. 热胁迫塑造有益土壤记忆
- 热损伤与后续保护悖论:36°C处理导致三七叶片热损伤率显著升高(约40%),但该温度预处理的根际土壤显著提升后续植株存活率(>90%),根腐病发生率降低50%(图1b-d)。
- 微生物介导机制:灭菌土壤中保护效应消失,证实微生物群落是核心因素(图1c)。
2. 特异性富集有益微生物
- 关键微生物鉴定:LEfSe分析显示36°C根际土壤中伯克霍尔德菌属(Burkholderia_Caballeronia_Paraburkholderia)相对丰度显著升高(图2b);酵母菌Saitozyma podzolica(fOTU5138)为最显著真菌标志物(图2e)。
- 功能验证:分离菌株B36(伯克霍尔德菌)和SP(S.podzolica)处理三七后:
- 植株叶片热损伤率下降30%,SOD酶活性提升80%(图2i-j);
- B36对根腐病菌(Fusarium solani, Plectosphaerella cucumerina)抑制率达70%(图2k);
- SP通过生态位竞争抑制病原菌扩展(图2l)。
3. 核苷酸代谢驱动微生物招募
- 代谢组-转录组关联分析:36°C下根系分泌物中嘌呤(腺嘌呤、黄嘌呤)和嘧啶(胸苷、尿苷)含量显著升高(图3c)。
- 核心通路激活:GSEA富集分析显示“嘌呤代谢”、“嘧啶代谢”通路基因(如腺苷激酶ADK、黄嘌呤脱氢酶XDH)显著上调(图3f),促进核苷酸降解产物分泌(图3g)。
- 外源验证:添加腺嘌呤(10μg/mL)使B36和SP生长率提升>150%,而病原菌无响应(图4b-c)。混合核苷酸添加自然土壤后,伯克霍尔德菌属丰度提升2倍(图4e)。
4. 跨物种应用潜力
- 微生物-核苷酸协同效应:辣椒和番茄中,B36+腺嘌呤联用使热损伤率降低60%,显著高于单一处理(图5c,g)。
- 土壤依赖性:非灭菌土壤中核苷酸增效更显著,证实其通过调控原生微生物群发挥作用(图S16)。
结论与意义
本研究首次揭示植物通过“核苷酸介导的微生物招募”抵御多重胁迫的机制:
- 核心机制:热胁迫(36°C)激活三七核苷酸代谢通路,促使根系分泌嘌呤/嘧啶类物质,选择性富集伯克霍尔德菌(B36)和酵母菌(SP)。
- 双重防护:B36通过直接拮抗病原菌,SP通过生态位竞争抑制根腐病;二者协同提升宿主SOD/POD抗氧化酶活性以缓解热损伤。
- 应用创新:提出“植物益生元(Plant Prebiotics)”概念——外源核苷酸可定向调控根际微生物组,在辣椒、番茄中验证其跨作物普适性。
该研究为应对全球变暖下作物多重胁迫挑战提供了新思路:利用内源核苷酸作为微生物组工程靶点,替代传统PGPR接种策略,有望实现更稳定的田间病害防控。未来需深入解析核苷酸感知