"Juanbi Qianggu Formula通过调控LncRNA ITSN1-2/miR-2683-3p/PELI3/RIP2轴抑制类风湿关节炎滑膜成纤维细胞活化的机制研究"

本研究针对类风湿关节炎(RA)中滑膜成纤维细胞(FLS)异常活化导致关节破坏的难题，揭示了传统中药Juanbi Qianggu Formula(JBQG)通过下调LncRNA ITSN1-2表达，解除其对miR-2683-3p的"海绵效应"，促进PELI3介导的RIP2 K48泛素化降解，从而抑制NOD2/RIP2/NF-κB信号通路的双重作用机制，为RA的精准治疗提供了新靶点。

　　

类风湿关节炎(RA)作为一种以滑膜炎和关节破坏为特征的自身免疫性疾病，全球患病率约0.5%-1%，我国患者超500万。尽管生物制剂和抗风湿药(DMARDs)的应用改善了预后，但仍有30%患者面临治疗抵抗和疾病进展。滑膜成纤维细胞(FLS)的异常活化是RA关节破坏的核心驱动因素，其通过分泌基质金属蛋白酶(MMPs)和促炎因子形成"恶性循环"。近年研究发现，长链非编码RNA(LncRNA)在RA发病中起关键调控作用，但具体机制尚未阐明。

上海中医药大学附属光华医院联合上海市中医药研究院关节病研究所的研究团队，针对临床有效中药复方Juanbi Qianggu Formula(JBQG)展开深入研究。该复方由国医大师施杞创制，包含补骨脂、骨碎补、淫羊藿等五味药材，前期临床证实可显著改善RA患者DAS28-ESR评分和炎症指标。研究人员通过多组学整合分析，首次揭示JBQG通过"LncRNA ITSN1-2/miR-2683-3p/PELI3/RIP2"轴调控滑膜炎症的新机制，相关成果发表于《Chinese Medicine》。

研究采用UHPLC-Q-Orbitrap HRMS鉴定JBQG血中移行成分，结合网络药理学预测靶点；收集24例RA和20例骨关节炎(OA)患者滑膜组织进行基因表达分析；通过胶原诱导关节炎(CIA)大鼠模型和体外FLS实验，采用荧光原位杂交(FISH)、免疫共沉淀(Co-IP)、双荧光素酶报告基因等技术验证分子机制。

LncRNA ITSN1-2/NOD2/RIP2信号在RA滑膜组织中显著激活
临床样本分析显示，RA患者滑膜中ITSN1-2和NOD2表达较OA患者升高2.3倍和1.8倍(P<0.01)，而E3泛素连接酶PELI3降低60%。ITSN1-2水平与DAS28-ESR(r=0.62)、CRP(r=0.58)及X线骨侵蚀评分(mSS)显著正相关(P<0.001)，提示其可作为疾病活动度标志物。

JBQG通过血中生物碱/黄酮成分调控ITSN1-2/PELI3轴
质谱鉴定出44种入血成分，其中青风藤生物碱占43.18%，补骨脂黄酮占27.27%。网络药理学显示99个共同靶点显著富集于NOD样受体信号通路(P<0.001)。体外实验证实10%含药血清可时间/浓度依赖性抑制FLS增殖(72h抑制率68%)和迁移(Transwell细胞数减少54%)，下调MMP1/3分泌(P<0.01)。

ITSN1-2通过ceRNA机制调控miR-6823-3p/PELI3
双荧光素酶报告基因证实ITSN1-2与PELI3竞争结合miR-6823-3p。FISH显示JBQG使胞质ITSN1-2减少62%，解除其对miR-6823-3p的抑制作用，使PELI3 mRNA上调2.1倍。Co-IP实验揭示PELI3促进RIP2 K48泛素化(增加3.5倍)，而非K63泛素化，导致RIP2蛋白半衰期缩短至4小时。

JBQG改善CIA大鼠关节炎症
在ITSN1-2过表达的CIA模型中，JBQG(23g/kg/d×4周)使踝关节直径减小37%，血清TNF-α降低52%。组织学显示滑膜炎症评分降低2.3分，软骨Safranin O染色保留率达71%，显著优于模型组(P<0.01)。

该研究首次阐明传统中药复方通过"LncRNA-miRNA-泛素化"网络调控RA滑膜活化的精确机制：上游通过降低ITSN1-2解除其对miR-6823-3p的封闭作用，下游通过PELI3促进RIP2 K48泛素化降解，双重抑制NF-κB信号传导。这不仅为JBQG的临床应用提供分子依据，更启示RA治疗可采取"ITSN1-2表达分型"的精准策略，并为开发NOD2抑制剂联合疗法奠定基础。研究局限性在于未阐明ITSN1-2在骨代谢中的直接作用，未来需通过共培养模型进一步验证。Yanqin Bian等学者的工作，为中医药现代化研究提供了"成分-靶点-通路-病机"多维验证的典范。