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海星臂再生神经索转录组从头组装揭示Asterias amurensis再生关键基因
【字体: 大 中 小 】 时间:2025年07月09日 来源:BMC Genomic Data 1.9
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本研究通过NGS技术对Asterias amurensis臂切除72小时后的神经索进行de novo转录组组装,鉴定出257,769个unigenes及147个DEGs(含43个上调/104个下调基因),结合GO/KEGG/NR/UniProt数据库注释揭示了再生相关基因功能。该研究为棘皮动物再生机制提供新见解,论文发表于《BMC Genomic Data》。
海洋生物再生能力一直是发育生物学的研究热点,其中海星因其独特的臂再生特性成为理想模型。然而,目前对西北太平洋优势种Asterias amurensis在分子层面的再生机制认知仍存在空白,特别是神经索组织在再生过程中的基因调控网络尚未系统解析。韩国釜山国立大学的研究团队通过高通量测序技术填补了这一空白。
研究采用Illumina平台对正常组和臂切除72小时组的神经索进行双端101bp测序,经Trimmomatic质控后获得总计1.58亿条clean reads(Q30>96%)。利用Trinity进行de novo组装生成359,822个contigs,经CD-HIT-EST去冗余得到257,769个unigenes(N50=735bp)。通过TransDecoder预测出17,628个ORF,并采用DIAMOND软件对GO/KEGG/NR/UniProt数据库进行功能注释。差异表达分析使用edgeR算法(FDR<0.05,|FC|>2),最终通过RT-qPCR验证关键DEGs的表达模式。
【实验设计与样本收集】
在15℃恒温海水系统中饲养的20cm个体被分为对照组(n=3)和臂切除组(n=3),72小时后采集神经索组织。这种严格的时间窗口设计确保了再生早期分子事件的捕捉。
【RNA提取与测序】
Hybrid-R试剂盒提取的RNA(RIN≥7)经TruSeq Stranded Total RNA建库后,产生GC含量44%/42%的两组数据。质控指标显示数据质量优异,为后续分析奠定基础。
【转录组组装与注释】
39.43%GC含量的unigenes中,KEGG通路注释揭示多个与细胞增殖(如Wnt信号通路)和组织重塑相关的基因簇。这种全面的功能注释为再生机制研究提供了分子地图。
【DEG与功能富集】
147个显著DEGs中,上调基因富集在神经发生相关通路,而下调基因多与能量代谢相关,暗示再生早期存在能量重分配现象。RT-qPCR对5个候选基因的验证证实了RNA-seq数据的可靠性。
该研究首次构建了A. amurensis神经索再生的转录组图谱,发现再生早期存在明显的转录重编程现象。特别值得注意的是,神经损伤修复相关基因(如neurofilament蛋白编码基因)的快速激活为理解棘皮动物神经再生提供了新线索。尽管受限于单一组织样本,但研究揭示的DEGs网络为后续多组织时空动态研究建立了重要参照系。这些发现不仅拓展了对海洋无脊椎动物再生机制的认知,也为比较医学研究提供了潜在分子靶点。
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