肿瘤新抗原驱动三阴性乳腺癌小鼠模型中显著抗肿瘤免疫的关键作用

本研究针对三阴性乳腺癌（TNBC）免疫治疗响应率低的难题，通过构建同源小鼠模型，探索了肿瘤新抗原（neoantigen）靶向策略的疗效。研究发现，预先暴露于肿瘤细胞（PETC）或肿瘤裂解物（TdL）可重塑肿瘤免疫微环境（TIME），显著抑制肿瘤生长和转移，并增强PD-L1阻断疗效。此外，脂质纳米颗粒（LNP）递送新抗原肽进一步优化了免疫激活效果，为个性化免疫治疗提供了新思路。

　　

论文解读

研究背景与意义

三阴性乳腺癌（TNBC）因缺乏雌激素受体、孕激素受体和HER2表达，治疗选择有限且预后较差。尽管免疫检查点抑制剂（ICIs）在多种癌症中取得突破，但TNBC的"免疫冷"特性导致其响应率不足。肿瘤新抗原（由体细胞突变产生的特异性蛋白片段）被认为是激活T细胞抗肿瘤免疫的关键靶点，但其在TNBC中的作用机制尚不明确。这一领域亟需探索新抗原驱动的免疫疗法及其与微环境互作的分子基础。

研究方法概览

首尔国立大学医院的研究团队通过同源4T1小鼠乳腺模型，系统评估了三种新抗原靶向策略：预先暴露于活肿瘤细胞（PETC）、肿瘤裂解物（TdL）治疗及脂质纳米颗粒（LNP）递送新抗原肽。结合单细胞RNA测序（scRNA-seq）、流式细胞术（FACS）和ELISpot等技术，解析了免疫细胞动态变化。新抗原筛选采用全外显子测序与DeepNeo算法预测，并通过体内外功能实验验证疗效。

主要研究结果

1. 预先暴露肿瘤细胞（PETC）诱导抗肿瘤免疫
通过手术切除短暂生长的4T1肿瘤后再次挑战，发现PETC小鼠肿瘤生长显著延迟。单细胞测序显示TIME中CD4⁺/CD8⁺ T细胞和B细胞比例增加，而中性粒细胞减少。值得注意的是，该效应具有肿瘤特异性——仅4T1预暴露能抑制后续4T1生长，而肾癌RENCA细胞预暴露无效。

2. 肿瘤裂解物（TdL）抑制原发与转移肿瘤
冻融法制备的4T1 TdL在预防性和治疗性模型中均表现出与PETC相似的疗效：肿瘤体积减少70%、肺转移结节数下降。机制上，TdL促进树突状细胞（DC）成熟（CD80⁺CD86⁺比例升高3倍），并激活抗原特异性T细胞分泌IFN-γ和TNF-α。

3. 新抗原肽-LNP的精准免疫激活
基于多组学筛选出Dtx2、Gk等基因来源的新抗原肽，通过LNP递送后显著增强DC抗原呈递能力。ELISpot显示LNP组T细胞对TdL的交叉反应性增强，证实新抗原特异性免疫记忆形成。

4. 联合PD-L1阻断的协同效应
TdL治疗上调TIME中PD-1/PD-L1通路基因表达。当联合抗PD-L1单抗时，肿瘤抑制率从单药的30%提升至80%，scRNA-seq揭示该组合可增加促免疫的CCL7⁺巨噬细胞，同时减少免疫抑制性S100A8⁺中性粒细胞。

结论与展望

本研究首次在TNBC模型中系统证实：新抗原靶向策略可通过重塑TIME增强免疫识别，其中LNP递送展现出精准调控优势。临床转化需解决两个关键问题——人类TNBC新抗原异质性高于小鼠模型，且LNP的大规模生产工艺尚待优化。未来可探索新抗原疫苗与放疗/化疗的序贯组合，或能进一步克服免疫抑制微环境。该成果为TNBC个性化免疫治疗提供了理论依据和技术路径。