基于CD4+/CD8+T细胞浸润与双硫死亡相关基因CCDC69/HMGB3的肉瘤预后模型构建及免疫治疗靶点发现

本研究针对肉瘤预后标志物匮乏的临床难题，通过整合TCGA-SARC和GEO-GSE21122数据集，首次揭示了双硫死亡相关基因（DRGs）在肉瘤分型中的关键作用。研究人员鉴定出CCDC69和HMGB3两个核心预后基因，构建的预测模型AUC值达0.730（1年），并通过mIHC证实HMGB3高表达与CD4+/CD8+T细胞浸润显著相关，为肉瘤免疫治疗提供新靶点。

　　

肉瘤作为一类罕见的间叶组织恶性肿瘤，虽然仅占成人肿瘤的1%，但其80余种亚型的异质性和5年生存率不足20%的现状，始终是临床治疗的重大挑战。当前肉瘤诊疗面临三大困境：缺乏特异性诊断标志物、化疗耐药性普遍存在、免疫治疗响应率不足30%。更棘手的是，约20%的肉瘤亚型属于"超罕见"类型，样本获取困难导致研究进展缓慢。在这种背景下，中南大学湘雅医院肿瘤中心和中南大学生命科学学院的研究团队将目光投向了一种新型细胞死亡方式——双硫死亡（Disulfidptosis）。这种由Xiaoguang Liu团队新发现的死亡模式，与细胞内二硫键应激导致的细胞骨架崩解密切相关，但其在肉瘤中的作用仍是未解之谜。

研究人员通过整合TCGA-SARC（260例）和GEO-GSE21122（149例）两大肉瘤队列，结合单细胞转录组（GSE119352）和组织微阵列（K105Sf01），采用多组学策略揭示了双硫死亡相关基因的临床价值。关键技术包括：1）基于15个DRGs的共识聚类分型；2）LASSO-Cox回归构建预后模型；3）CIBERSORT算法评估免疫浸润；4）mIHC验证靶点蛋白表达与T细胞空间分布。

3.1 DRGs在肉瘤中的表达与生存关联
分析显示FLNB、ACTN4和SLC7A11在肉瘤组织中显著上调（P<0.0001），而MYL6和ACTB高表达患者总生存期延长（HR=0.62）。值得注意的是，SLC7A11作为双硫死亡关键基因，其低表达组反而预后更好，暗示肉瘤中可能存在独特的二硫代谢调控机制。

3.2 基于DRGs的肉瘤分子分型
共识聚类将患者分为C1（n=184）和C2（n=76）两型，C2型展现显著生存优势（P=0.017）。药敏分析揭示C1型对阿西替尼（Axitinib）等5种化疗药物更敏感（IC₅₀降低42%），而C2型具有更低的TIDE评分（P<0.0001），提示其对免疫检查点抑制剂可能更响应。

3.3 预后模型构建与验证
从163个差异基因中筛选出CCDC69（Coiled-Coil Domain-Containing Protein 69）和HMGB3（High-Mobility Group Box 3）构建模型：风险评分=0.0952×HMGB3-0.0913×CCDC69。该模型在TCGA队列中3年预测AUC达0.709，且CCDC69高表达组生存期延长2.3倍，而HMGB3高表达组死亡风险增加1.8倍。

3.7 HMGB3蛋白的临床验证
mIHC显示肉瘤组织中HMGB3阳性率较正常组织提高3.2倍（P<0.001），且在横纹肌肉瘤中表达最显著。值得注意的是，HMGB3高表达组中CD4⁺/CD8⁺T细胞浸润密度增加2.1倍（r=0.68），这与单细胞数据中HMGB3主要在CD8⁺T和NK细胞富集的结果相互印证。

这项研究开创性地建立了双硫死亡相关基因与肉瘤免疫微环境的联系，揭示CCDC69的保护作用和HMGB3的促癌机制。特别重要的是，HMGB3高表达与CD8⁺T细胞浸润的正相关性（P<0.001），为PD-1/CTLA-4抑制剂在肉瘤中的应用提供了新的生物标志物。团队发现的预后模型在外部验证队列中保持稳定预测效能，其临床转化将有助于解决肉瘤患者分层治疗的难题。未来研究可进一步探索DRGs调控T细胞功能的分子机制，以及靶向HMGB3能否增强现有免疫疗法的响应率。