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糖甜菜BvSnRK2.1基因的异源表达通过多维度防御机制增强烟草耐盐性
【字体: 大 中 小 】 时间:2025年07月10日 来源:Plant Growth Regulation 3.5
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本研究针对土壤盐渍化对作物生长的威胁,通过克隆糖甜菜(Beta vulgaris L.)的BvSnRK2.1基因并转化烟草,系统解析了该基因通过协调离子平衡(NbSOS1/NbNHX)、抗氧化系统(SOD/POD/CAT)和渗透调节(脯氨酸/可溶性糖)等多重途径增强植物耐盐性的分子机制。结果表明,转基因烟草在200 mM NaCl胁迫下根系生长量提升2.19倍,光合效率提高2.8倍,为作物抗逆育种提供了新靶点。
土壤盐渍化已成为威胁全球农业生产的严峻问题,据统计,超过20%的灌溉农田因盐害导致作物减产。面对这一挑战,植物进化出复杂的应激响应网络,其中蔗糖非发酵1相关蛋白激酶2(SnRK2)家族作为关键调控因子备受关注。然而,对于糖甜菜这一重要耐盐作物中SnRK2成员的功能解析仍存在空白。兰州理工大学的研究团队在《Plant Growth Regulation》发表的研究,首次揭示了糖甜菜BvSnRK2.1基因通过多维度防御机制增强植物耐盐性的创新发现。
研究采用基因克隆、系统发育分析和农杆菌介导的遗传转化等技术手段。通过构建pEG100-BvSnRK2.1载体转化烟草,获得T2代转基因株系;利用qRT-PCR检测基因表达,结合生理指标测定(抗氧化酶活性、渗透物质含量)和组化染色(DAB/NBT)评估耐盐性;通过火焰原子吸收光谱法测定离子含量,便携式光合仪监测Pn(净光合速率)。
BvSnRK2.1的系统发育与表达特征
系统发育分析显示BvSnRK2.1属于SnRK2家族Group II亚群,与ABA信号通路关联较弱。转基因烟草中BvSnRK2.1表达量显著提升,T2代仍保持稳定遗传。
根系发育与光合稳定性增强
在150 mM NaCl胁迫下,转基因株系OE3根长比野生型(WT)增加2.19倍(P<0.05)。盐胁迫14天后,OE3叶绿素含量和Pn分别比WT高54.02%和2.8倍,表明BvSnRK2.1能有效维持光合器官功能。
ROS清除系统的激活
DAB/NBT染色显示转基因植株H2O2和O2.-积累减少。酶活检测证实OE3的POD、SOD、CAT活性分别比WT高39.55%、25.81%和32.30%,相关基因NbSOD/NbCAT表达量提升2.5倍。
渗透调节物质积累
盐胁迫下转基因株系脯氨酸含量增幅达119%,可溶性糖和蔗糖含量分别增加50.45%和47.74%。qRT-PCR显示脯氨酸合成关键基因NbP5CS表达上调3.03倍。
离子稳态调控
转基因植株Na+含量降低31%,K+/Na+比值提高1.8倍,离子转运基因NbSOS1、NbNHX和NbAKT表达显著上调。
该研究阐明BvSnRK2.1通过三重防御机制协同增效:1)通过NbSOS1/NbNHX调控离子平衡;2)激活SOD/POD/CAT抗氧化系统;3)促进脯氨酸/可溶性糖积累维持渗透平衡。这一发现不仅丰富了SnRK2家族功能认知,更为设计多基因叠加的作物耐盐育种策略提供了理论依据。研究首次揭示Group II SnRK2成员在非ABA依赖途径中的独特作用,为应对全球土壤盐渍化挑战提供了新思路。
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