基于多重PCR技术的烟粉虱多重菜豆金花叶病毒同步检测及隐存种鉴定研究

本研究针对烟粉虱（Bemisia tabaci）传播多种菜豆金花叶病毒（Begomovirus）导致辣椒作物严重减产的问题，通过优化DNA提取方法和建立多重PCR（M-PCR）技术，首次在单头烟粉虱中同步检测出ChiLCBV、ChiLCSV和ChiLCSLV三种病毒，并鉴定其隐存种为Asia II 5型。该成果为靶向防控烟粉虱及病毒传播提供了重要科学依据。

　　

辣椒作为全球重要的经济作物，近年来因烟粉虱（Bemisia tabaci）传播的菜豆金花叶病毒（Begomovirus）导致辣椒卷叶病肆虐，造成严重产量损失。在印度泰米尔纳德邦，这一问题尤为突出。研究人员从特里奇和佩兰巴卢尔地区的辣椒田中采集了185头烟粉虱样本，旨在开发一种高效的多重PCR（M-PCR）检测技术，同步鉴定烟粉虱携带的多种病毒及其隐存种类型。

研究团队采用改良的DNA提取方法，从单头烟粉虱中成功分离基因组DNA，并通过优化的M-PCR体系同步检测出三种病毒：辣椒卷叶Bhavanisagar病毒（ChiLCBV）、辣椒卷叶Salem病毒（ChiLCSV）和辣椒卷叶斯里兰卡病毒（ChiLCSLV），扩增片段分别为264 bp、377 bp和800 bp。为明确烟粉虱隐存种与病毒携带的关系，研究还扩增了线粒体细胞色素c氧化酶亚基1（mtCOI）基因并进行测序分析。

Whitefly Sample Collection
在泰米尔纳德邦两个地区共采集185头烟粉虱，采用个体冷冻保存法确保样本完整性。

DNA Extraction
改良的裂解缓冲液法提取的DNA经电泳验证质量，为后续检测提供可靠模板。

Detection of Begomoviruses
M-PCR检测显示：11.89%样本未携带目标病毒，8.65%同时感染三种病毒，14.59%存在ChiLCSLV+ChiLCBV混合感染，12.43%为ChiLCSV+ChiLCBV共感染。

DISCUSSION
研究首次证实Asia II 5隐存种是三种病毒的高效传播媒介，其多重感染模式暗示该地区存在复杂的病毒-载体互作网络。

Conclusion
建立的M-PCR技术为田间病毒监测提供高效工具，Asia II 5的鉴定为区域化防控策略制定奠定基础。该成果发表于《Physiological and Molecular Plant Pathology》，对理解媒介-病毒协同进化及综合治理具有重要价值。研究同时发现约12%样本未检出病毒，提示需进一步探究烟粉虱种群动态与病毒传播效率的关系。