盐皮质激素受体通过中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）通路驱动肠道纤维化的机制研究

针对炎症性肠病（IBD）患者肠道纤维化缺乏特效疗法的难题，研究人员聚焦盐皮质激素受体（MR）及其靶点中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）的作用机制。通过动物模型（DSS诱导慢性结肠炎）和细胞实验，首次证实MR拮抗剂螺内酯或平滑肌特异性MR基因缺失可显著抑制肠道纤维化，并揭示NGAL是MR下游调控TGF-β1/SMAD通路的关键介质。该研究为IBD纤维化提供了新靶点，支持已上市MR拮抗剂的临床转化潜力。

　　

论文解读

炎症性肠病（IBD）患者中，超过50%的克罗恩病（CD）和5%的溃疡性结肠炎（UC）患者会发展为肠道纤维化，导致肠腔狭窄、反复手术，甚至肠道功能丧失。尽管抗炎药物（如抗TNF制剂）能控制炎症，但对纤维化进程作用有限，亟需针对纤维化机制的特异性疗法。盐皮质激素受体（MR）在心脏、肾脏等器官的纤维化中已被证实是关键调控因子，且其拮抗剂（如螺内酯）是已上市的安全药物。然而，MR在肠道纤维化中的作用尚不明确。法国国家健康与医学研究院（INSERM）联合诺曼底鲁昂大学的研究团队在《Nature Communications》发表研究，首次揭示MR-NGAL通路在肠道纤维化中的核心机制，为IBD治疗开辟新路径。

研究人员综合运用三类关键技术：

1. 动物模型：采用雄性C57BL/6J小鼠构建慢性葡聚糖硫酸钠（DSS）诱导的结肠炎纤维化模型（3周期循环给药），并通过三硝基苯磺酸（TNBS）模型验证普适性；
2. 细胞实验：利用人结肠成纤维细胞（CCD-18Co）、人肠微血管内皮细胞（HIMEC）及小鼠原代结肠平滑肌细胞（SMC），探究MR激动剂（醛固酮）和拮抗剂（螺内酯）对纤维化标志物（如α-SMA、COL1、MMP）的影响；
3. 分子机制分析：结合染色质免疫沉淀（ChIP）、基因沉默（siRNA靶向NGAL）和转基因动物（SMC特异性MR基因敲除、NGAL全局敲除小鼠），验证MR-NGAL转录调控及下游TGF-β1/SMAD通路的作用。

研究结果

1. DSS慢性结肠炎激活MR信号
在DSS模型中，小鼠血浆醛固酮水平显著升高（图1b），结肠MR蛋白及其下游靶点血清糖皮质激素调节激酶1（SGK1）表达上调（图1c,d），表明MR通路在肠道纤维化中被激活。

2. MR拮抗剂螺内酯抑制纤维化
螺内酯治疗降低纤维化标志基因表达（Tgfb1、Smad2/3、Mmp3/9、Timp1）（图2a），减少胶原沉积（COL1蛋白下降，图2b）和基质金属蛋白酶活性（MMP-2/9，图2d），并抑制TGF-β1产生及SMAD2/3磷酸化（图2e,f）。螺内酯还减轻炎症（体重回升、结肠重量/长度比降低、MPO活性下降）。

3. 平滑肌细胞（SMC）特异性MR缺失阻断纤维化
SMC中条件性敲除MR（sm22-MR^-/-）显著降低纤维化评分和胶原面积（图3c），抑制MMP-2/9活性和TGF-β1/SMAD信号（图3d–f）。该效果在雌性小鼠中更显著，可能与性激素-MR相互作用有关。

4. NGAL是MR下游关键介质
MR激活上调结肠NGAL表达（图5a–e），而螺内酯或SMC-MR缺失可阻断此效应。机制上，MR直接结合NGAL启动子（ChIP证实，图6b），而NGAL基因敲除（NGAL^-/-）小鼠的纤维化程度显著减轻（α-SMA、COL1降低，图7a,b），且TGF-β1/SMAD通路被抑制（图7e,f）。

5. 细胞模型验证MR-NGAL轴
醛固酮通过MR诱导CCD-18Co和HIMEC细胞表达α-SMA、COL1及MMP-2（图4b–e, g–j），而NGAL沉默或重组NGAL处理分别阻断或模拟该效应（图8a–f），证实NGAL介导MR的促纤维化作用。

结论与意义

本研究首次阐明：MR激活通过直接调控NGAL表达，驱动TGF-β1/SMAD通路，导致肠道成纤维细胞活化、内皮-间质转化（EndoMT）及胶原沉积，最终引发纤维化（图10）。其重要意义在于：

1. 机制创新：确立MR-NGAL轴为肠道纤维化的核心通路，补充了IBD"炎症-纤维化"转化机制的空缺；
2. 治疗转化：MR拮抗剂（如螺内酯）作为已上市药物，安全性明确，可直接推进IBD纤维化适应症的临床试验；
3. 个体化医疗：基于MR/NGAL表达水平的患者分层，可能优化抗纤维化疗法的精准应用。
   该研究不仅为IBD提供了首个针对纤维化的靶向治疗策略，也为其他器官纤维化研究提供了范式参考。