血浆游离DNA PCR技术对毛霉菌病无创诊断的准确性研究：免疫抑制患者的高敏感性与特异性验证

这篇研究通过回顾性队列分析，验证了血浆游离DNA（cfDNA）PCR技术在毛霉菌病（Mucormycosis）诊断中的临床价值。结果显示，该技术对免疫抑制患者（IS）的总体敏感性达92.1%，在播散性和肺部感染中分别达到100%和89.5%，特异性为92.9%。研究强调了该技术对传统侵入性诊断（如组织活检）的替代潜力，尤其适用于无法耐受侵入性操作的危重患者，为早期精准治疗提供了新策略。

　　

ABSTRACT
毛霉菌病是一种高致死率的侵袭性真菌感染，早期诊断对改善预后至关重要。本研究评估了血浆游离DNA（cfDNA）PCR技术在免疫抑制与非免疫抑制患者中的诊断性能。结果显示，该技术对确诊或拟诊病例的总体敏感性为85.1%（95% CI, 71.7–93.8），特异性达92.9%（95% CI, 88.0–96.3）。值得注意的是，免疫抑制患者的敏感性显著高于非免疫抑制患者（92.1% vs. 55.6%），且播散性感染检测敏感性高达100%。

INTRODUCTION
毛霉菌病由毛霉目真菌（如根霉属Rhizopus、毛霉属Mucor）引起，常见于糖尿病、器官移植和COVID-19合并症患者。传统诊断依赖侵入性标本的组织病理学或培养，但敏感性低且耗时。血浆cfDNA PCR通过检测循环中的真菌DNA片段，为无创诊断提供了新途径。

MATERIALS AND METHODS
研究纳入斯坦福医疗中心2020-2024年接受Mucorales cfDNA PCR检测的297例患者（85例阳性，212例阴性）。采用EORTC/MSGERC标准定义病例，通过单重实时PCR检测Rhizopus、Mucor和Rhizomucor的18S rRNA基因，阈值周期（Ct）<40判为阳性。

RESULTS

• 患者特征：88.2%为免疫抑制患者（血液系统恶性肿瘤28.3%，造血干细胞移植26.3%），77.8%表现为肺部感染。
• 诊断效能：免疫抑制患者中，肺部感染敏感性89.5%，播散性感染100%；非免疫抑制患者敏感性仅55.6%。局部感染（如鼻窦）敏感性最低（64.3%），但免疫抑制亚组仍达83.3%。
• 假阴性分析：7例假阴性中，5例为糖尿病患者，主要涉及局部感染。假阳性结果（12例）多与单次高Ct值（≥38）相关。

DISCUSSION
该技术的高敏感性在免疫抑制人群中尤为突出，可能与其真菌负荷量高、cfDNA释放多有关。局限性包括未覆盖Lichtheimia等地域性病原体，且回顾性设计可能影响结果泛化性。未来需多中心研究验证其普适性。

ACKNOWLEDGMENTS
感谢斯坦福医疗中心实验室团队的技术支持。