综述：鱼类胚胎、雌性生殖细胞与组织的长期保存研究进展

这篇综述系统探讨了鱼类胚胎、卵母细胞（oocytes）、性腺组织及原始生殖细胞（PGCs）的低温保存（cryopreservation）技术与研究进展，重点分析了冷冻保护剂（CPAs）、预处理方法、复温技术及评估体系，为水产育种和生物多样性保护提供了重要参考。

　　

ABSTRACT

低温保存（cryopreservation）是长期保存生物材料的有效手段，对水产养殖业的育种优化具有重要意义。目前，鱼类精子因结构简单成为最成功的低温保存案例，但雌性配子（如卵母细胞）及胚胎的保存技术进展缓慢。本文综述了鱼类胚胎、卵裂球（blastomeres）、性腺组织（睾丸与卵巢）及原始生殖细胞（PGCs）的保存策略，涵盖冷冻保护剂（CPAs）的选择、玻璃化（vitrification）技术应用，以及预处理、复温、CPA去除和效果评估等关键环节。

技术进展与挑战

冷冻保护剂：针对鱼类胚胎的高渗透抗性，研究尝试了二甲亚砜（DMSO）和丙二醇等CPAs的复合配方，但卵黄膜屏障仍是渗透效率的主要限制。玻璃化技术通过超快速冷冻避免了冰晶损伤，但高浓度CPA的毒性问题亟待解决。性腺组织保存中，睾丸组织的冷冻效果优于卵巢，可能与细胞异质性较低有关。

评估体系：存活率、受精能力和基因稳定性是核心指标。例如，PGCs移植后的生殖腺定殖效率被用于验证冷冻后细胞功能。

未来方向

建议开发低毒性CPA、优化多阶段复温程序，并探索微流体等新型冷冻技术。此外，建立鱼类种质资源库需标准化冷冻流程与跨物种适配性研究。

Conflicts of Interest

作者声明无利益冲突。