唾液酸化修饰对毛细管凝胶电泳(SDS-CGE)分离生物治疗药物的关键影响

本研究针对生物治疗药物关键质量属性(CQAs)分析难题，揭示了唾液酸化修饰通过影响十二烷基硫酸钠-毛细管凝胶电泳(SDS-CGE)中SDS结合效率导致双峰现象。研究人员综合运用离子交换色谱(IEX)、亲水相互作用色谱质谱(HILIC-MS)和超高效分子排阻色谱(UP-SEC)，证实O-连接糖基化是产生双峰的根源，酶切去唾液酸后异质性消失。该发现为复杂糖基化药物的质控提供了新方法学支持。

　　

监测关键质量属性(CQAs)是生物治疗药物开发的核心环节。当研究人员采用十二烷基硫酸钠-毛细管凝胶电泳(SDS-CGE)分析"生物治疗药物1"时，在还原条件下意外发现第二个神秘峰，这个顽皮的副峰严重干扰了峰积分计算和方法验证工作。

通过分子量标准品校准发现，这两个双胞胎似的峰具有高度重现性，不仅在SDS-CGE中反复出现，在LabChip芯片实验中也不离不弃。科研侦探们动用色谱-质谱联用技术展开追踪：离子交换色谱(IEX)像精确的筛子、亲水相互作用色谱质谱(HILIC-MS)充当分子显微镜、超高效分子排阻色谱(UP-SEC)则化身空间测量仪，最终锁定真凶——O-连接糖基化修饰在搞鬼。

特别有趣的是，还原峰2这个"坏小子"携带了唾液酸修饰，导致其SDS结合能力与裸奔的还原峰1产生差异，就像穿着蓬蓬裙跑马拉松的运动员。当用酶剪刀剪掉这些唾液酸"裙摆"后，所有分子都整齐划一地跑出单峰。这项发现生动展示了单个O-连接聚糖如何像分子变速器般调控SDS-CGE分离行为，为解析复杂糖基化药物的结构异质性提供了新视角。

文末声明中，作者们像严谨的科学家般强调不存在利益冲突，所有实验数据真实可靠。