自体与异体人源胆管细胞类器官疗法的免疫原性研究：HLA匹配的关键作用与临床转化意义

本研究针对胆管疾病再生治疗中细胞疗法的免疫原性难题，剑桥大学团队通过体外共培养和人源化小鼠模型，系统评估了原发性胆管细胞类器官(PCOs)在自体与异体移植中的免疫反应特征。研究发现炎症条件下PCOs上调HLA-I/II表达，异体免疫反应可通过供受体HLA匹配显著缓解，而自体PCOs仍会引发低水平免疫浸润。该研究为器官类细胞疗法的临床设计提供了关键免疫学依据，发表于《Cell Reports Medicine》。

　　

在再生医学领域，细胞疗法为修复受损组织带来了革命性希望，但免疫排斥问题始终是临床转化的"阿喀琉斯之踵"。尤其对于胆管疾病患者，现有治疗手段有限，而基于胚胎干细胞(ESC)或诱导多能干细胞(iPSC)的分化策略存在基因修饰风险。更令人困扰的是，即便是自体来源的细胞疗法，也可能因体外培养获得突变而触发免疫反应。这些瓶颈严重制约着胆管类器官疗法的临床应用。

剑桥大学和NIHR剑桥生物医学研究中心的外科团队在《Cell Reports Medicine》发表的研究，首次系统揭示了人原发性胆管细胞类器官(PCOs)的免疫原性特征。研究人员通过建立70余例HLA分型的胆管类器官库，结合人源化小鼠模型和单细胞分辨率分析，破解了自体与异体PCOs移植后的免疫应答规律。

研究采用四大关键技术：1) 从死亡器官捐赠者获取配对胆管组织和脾脏单核细胞(SPMCs)建立实验体系；2) 通过干扰素-γ(IFN-γ)刺激模拟炎症环境，采用流式细胞术和RT-qPCR检测HLA表达谱；3) 构建NSG人源化小鼠模型，移植HLA全错配、部分匹配(仅HLA-I匹配)及自体PCOs；4) 运用质谱流式(CyTOF)和空间转录组(GeoMx)解析免疫细胞浸润特征。

HLA表达调控机制
研究发现静息状态下PCOs高表达HLA-I但低表达HLA-II(<40%)，而在IFN-γ刺激或人源化小鼠体内环境中，两者均显著上调

。这种动态调控提示临床移植后可能触发T细胞和B细胞双重免疫应答。

匹配程度决定免疫反应强度
体外共培养实验显示，完全错配组IFN-γ、TNF-α和IL-6分泌量显著高于部分匹配组(p<0.01)

。人源化小鼠实验进一步证实，完全错配组移植物区CD45⁺细胞浸润比例(30.9±2.7%)是自体组的5.6倍，且伴随B细胞和调节性T细胞(Tregs)富集

。

自体疗法的潜在风险
令人意外的是，自体PCOs仍引起5-10%的CD45⁺细胞浸润。纳米孔测序(NanoSeq)揭示体外培养每传代5次会产生约14个蛋白编码突变，加之细胞活性和基质成分影响，可能是诱发低水平免疫反应的原因。

免疫应答的时相特征
空间转录组分析发现，部分匹配组呈现早期急性排斥特征(以CD8⁺记忆T细胞为主)，而完全错配组表现为慢性排斥模式(B细胞/Tregs通路激活)。这种时相演变与临床肾移植排斥的转录特征高度吻合。

该研究首次绘制了原发性胆管类器官的免疫原性图谱，证实HLA匹配可降低但无法完全消除异体免疫反应，而自体疗法也需警惕培养相关突变风险。这些发现为"现货型"异体疗法的HLA配型策略提供了量化依据，同时提示合成水凝胶等新型培养体系可能改善自体疗法安全性。研究建立的评价体系更为其他实体器官类器官的免疫评估提供了范式，将加速再生疗法的临床转化进程。