METTL3介导ULBP2的m6A甲基化修饰调控宫颈癌进展及放疗抵抗的分子机制研究

本研究针对宫颈癌(CC)放疗抵抗的临床难题，揭示了METTL3通过m6A甲基化修饰调控ULBP2表达的新机制。西安交通大学第二附属医院团队综合运用生物信息学分析、体外功能实验和体内移植瘤模型，证实ULBP2高表达促进CC恶性进展，METTL3/IGF2BP1轴通过增强ULBP2 mRNA稳定性驱动肿瘤发生。研究首次发现肠道菌群动态变化与放疗敏感性相关，为CC靶向治疗提供了新策略。该成果发表于《Hereditas》，为克服CC治疗抵抗提供了理论依据和潜在干预靶点。

　　

宫颈癌作为威胁女性健康的重大疾病，放疗抵抗始终是临床治疗的"阿喀琉斯之踵"。传统观点认为肿瘤微环境中的免疫逃逸是关键因素，但表观遗传调控在此过程中的作用尚不明确。西安交通大学第二附属医院放疗科的研究团队独辟蹊径，聚焦RNA表观修饰核心酶METTL3与免疫调节分子ULBP2的调控关系，揭示了宫颈癌恶性进展的新机制。

研究采用TCGA数据库分析结合临床样本验证，发现ULBP2在宫颈癌组织显著高表达且与不良预后相关。通过构建梯度放射剂量模型，首次证实放疗可诱导ULBP2表达上调。团队运用shRNA干扰、过表达等基因操作技术，结合MTT/EdU增殖检测、Transwell侵袭实验等技术平台，系统阐释了ULBP2促进肿瘤生长的生物学功能。创新性采用MeRIP-qPCR和RIP-qPCR技术，证实METTL3通过m6A修饰增强ULBP2 mRNA稳定性，而读者蛋白IGF2BP1是这一过程的关键效应分子。动物实验进一步验证沉默ULBP2可增强放疗敏感性，16S rDNA测序则揭示了放疗过程中肠道菌群的动态变化规律。

ULBP2在宫颈癌中高表达
通过TCGA-GEPIA数据库分析和32对临床样本验证，发现ULBP2在宫颈癌组织mRNA和蛋白水平均显著升高（图1E-F）。宫颈癌细胞系（C-33A、SiHa、HeLa）中ULBP2表达明显高于正常宫颈上皮细胞Ect1/E6E7（图1G），且放射剂量依赖性上调（图1H-I）。

ULBP2沉默抑制肿瘤恶性表型
shRNA敲低ULBP2后（图2A），宫颈癌细胞增殖（MTT/EdU实验，图2B-C）、迁移（伤口愈合实验，图2F）和侵袭（Transwell实验，图2E）能力显著减弱，凋亡率升高（图2D）。克隆形成实验证实ULBP2缺失增强放疗敏感性（图2G-H）。

METTL3介导m6A修饰调控ULBP2
生物信息学预测ULBP2存在m6A修饰位点（图3A-D）。METTL3（非METTL14）敲除显著降低ULBP2表达（图3G-H），MeRIP-qPCR证实其直接调控ULBP2的m6A修饰（图3I-J）。RIP实验显示METTL3与ULBP2 mRNA结合（图3K），ActD处理证实METTL3维持ULBP2 mRNA稳定性（图3L-M）。

IGF2BP1识别m6A修饰
ENCORI数据库预测IGF2BP1与ULBP2互作（图4A）。敲低IGF2BP1降低ULBP2表达（图4C-D），且减弱METTL3介导的m6A修饰识别（RIP-qPCR，图4E-F）。RNA稳定性实验显示IGF2BP1缺失加速ULBP2降解（图4G-H）。

体内验证与菌群分析
裸鼠移植瘤实验表明ULBP2敲除联合放疗显著抑制肿瘤生长（图6A-B），IHC显示PCNA和ULBP2表达下调（图6D）。肠道菌群分析揭示放疗显著改变α/β多样性（图7A-B），厚壁菌门等比例发生明显变化（图7C）。

该研究创新性构建了METTL3-m6A-ULBP2分子轴，阐明表观修饰通过调控免疫相关分子影响宫颈癌放疗抵抗的机制。发现METTL3/IGF2BP1通过m6A依赖性方式稳定ULBP2 mRNA，为联合靶向治疗提供新思路。首次报道放疗过程中肠道菌群动态变化，为探索菌群-表观遗传互作网络奠定基础。这些发现对改善宫颈癌患者预后具有重要临床价值。