Notch信号通路分子分型揭示混合型肝癌-胆管癌的异质性特征及预后价值

本研究针对混合型肝癌-胆管癌(cHCC-CCA)诊断困难、分子机制不清的临床难题，通过整合免疫组化(IHC)和转录组测序技术，首次发现NOTCH1/HES5激活状态可将cHCC-CCA分为Notch失活型、Notch响应型和Notch无响应型三个亚组，其中Notch响应型具有类似胆管癌(CCA)的侵袭性特征和较差预后，为靶向Notch通路治疗提供重要依据。

　　

肝脏作为人体最大的代谢器官，其恶性肿瘤的复杂性一直困扰着医学界。其中混合型肝癌-胆管癌(cHCC-CCA)这种同时具有肝细胞癌(HCC)和胆管癌(CCA)特征的罕见肿瘤，仅占原发性肝癌的5%，却因诊断标准模糊和治疗方案缺乏成为临床实践的"灰色地带"。更棘手的是，这类肿瘤患者预后差异极大，部分病例进展迅猛，但至今仍缺乏有效的预测指标。

韩国Ajou大学医学院的研究团队在《Virchows Archiv》发表的重要研究中，将目光投向了调控细胞命运的关键通路——Notch信号通路。既往研究表明，Notch通路在肝脏发育和肿瘤发生中扮演双重角色，但其在cHCC-CCA中的作用机制仍是未解之谜。研究人员通过对35例cHCC-CCA、38例HCC和32例CCA的手术标本进行多组学分析，首次绘制出cHCC-CCA的Notch信号图谱。

研究采用免疫组化(IHC)定量检测NOTCH1和HES5蛋白表达，通过qRT-PCR测量Notch通路相关基因转录水平，并运用RNA测序进行全转录组分析。来自Ajou大学医学中心的105例肿瘤样本构成了研究队列，所有病例均经过至少三位资深病理学家复核诊断。

研究结果揭示：

分子特征分析显示
cHCC-CCA中NOTCH1表达显著高于CCA(p<0.05)和HCC(p<0.01)，其下游靶基因HES1的表达更是达到HCC的16倍。蛋白水平检测验证了这一发现，HES5在cHCC-CCA的阳性率是CCA的3.4倍(p<0.001)。

亚组分类标准确立
基于NOTCH1/HES5表达谱，研究者创新性地将cHCC-CCA分为三组：Group 1(Notch失活型，占66%)表现为低NOTCH1伴HES5波动；Group 2(Notch响应型，14%)显示NOTCH1/HES5双高表达；Group 3(Notch无响应型，20%)则呈现NOTCH1高表达但HES5抑制的特征。

转录组特征解析
RNA测序显示Group 2的基因富集模式与CCA高度相似，包括"染色质重塑"和"MAPK级联"等通路激活。基因集富集分析(GSEA)证实该组NOTCH1靶基因显著上调，同时具有肿瘤侵袭性相关基因特征。

临床预后关联
尽管样本量有限，Group 2展现出最差的临床进程：80%存在血管侵犯，40%为多灶性病变，其无进展生存期(PFS)风险比达7.708(p=0.0002)，预后趋势与CCA相似。

这项研究的意义在于首次建立了cHCC-CCA的Notch通路分子分型体系，破解了这类肿瘤异质性难题。特别是发现占14%的Notch响应型亚组具有"伪装"成CCA的分子特征和侵袭性生物学行为，这为临床识别高危患者提供了NOTCH1/HES5这一对可靠的生物标志物。更值得关注的是，该研究为靶向治疗指明方向——γ-分泌酶抑制剂等Notch通路靶向药物可能成为Group 2患者的精准治疗选择，而免疫检查点抑制剂在该人群的疗效也值得探索。

研究也存在样本量有限、未分析肿瘤微环境等局限，但提出的分子分型框架为后续研究奠定基础。随着单细胞测序等技术的应用，Notch通路与其他致癌通路的交互机制将成为未来研究重点。这项发表于欧洲病理学权威期刊的成果，不仅为cHCC-CCA的精准诊疗开辟新途径，更为理解肝脏肿瘤的谱系可塑性提供了重要线索。