基于SNAP-tag/CMC技术的β1-肾上腺素受体拮抗剂筛选模型构建及在奈必洛尔异构体活性评价中的应用

为解决β1-肾上腺素受体（ADRβ1）拮抗剂筛选方法特异性不足的问题，研究人员开发了基于SNAP-tag技术的细胞膜色谱（CMC）模型，成功应用于奈必洛尔及其副产物的活性筛选，发现D-奈必洛尔（SRRR-对映体）具有最优亲和力，为复杂样本中ADRβ1靶向药物开发提供了高效平台。

　　

心力衰竭作为全球性健康危机，其治疗核心药物β₁-肾上腺素受体（ADRβ1）拮抗剂的筛选却面临方法学瓶颈——传统技术如高效液相色谱（HPLC）缺乏靶向性，而生物传感器成本高昂。更棘手的是，临床常用药奈必洛尔因含四个手性中心，其难以分离的副产物可能影响药效，但现有手段无法高效评估其活性。

陕西某研究机构（从基金编号2022JM-474推断为陕西省属单位）的Liju Yu团队创新性地将SNAP-tag（一种蛋白质标记技术）与细胞膜色谱（CMC）结合，构建了ADRβ1-SNAP-tag/CMC模型。该技术通过SNAP-tag与O⁶-苄基鸟嘌呤（BG）的共价结合，将受体稳定固载于色谱柱，实现了从复杂样本中精准捕获ADRβ1结合成分。研究论文发表于药物分析领域权威期刊《Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis》。

关键技术包括：1）采用qPCR和Western blot验证HEK293细胞中ADRβ1-SNAP-tag的过表达；2）优化CMC系统流速、温度等参数；3）钙内流实验检测化合物对ADRβ1的功能调控。

研究结果显示：
• 模型验证：ADRβ1-SNAP-tag细胞中受体基因表达提升360倍，色谱柱寿命达40次进样仍保持90%活性，显著优于传统CMC。
• 活性筛选：在奈必洛尔四种对映体中，D-奈必洛尔（SRRR型）表现出最强保留特性（保留时间12.3分钟），三种副产物也显示明显色谱峰。
• 功能验证：钙信号检测证实D-奈必洛尔对ADRβ1的抑制率达82%，副产物抑制率为45-68%，揭示其潜在药理活性。

该研究突破性地解决了靶向受体色谱固定化的稳定性难题，为心血管药物开发提供了两大价值：一是首次系统评价奈必洛尔副产物的ADRβ1活性，推动手性药物质量控制；二是建立的高通量筛选平台可拓展至GPCR（G蛋白偶联受体）家族其他靶点。正如作者所述，这项技术将加速从复杂基质（如中药提取物）中发现新型ADRβ1调节剂，为心力衰竭的精准治疗注入新动能。