基于H2受体亲和色谱技术的甘草抗溃疡活性成分筛选与作用机制研究

本研究针对H2受体（H2R）靶向药物筛选效率低的问题，创新性地构建了固定化H2R色谱模型，从甘草中筛选出活性成分甘草苷（liquiritin），并通过竞争置换实验和分子对接揭示其与临床药物（nizatidine/ranitidine/famotidine）的差异化结合机制，为中药活性成分筛选提供了新方法。

　　

研究背景
胃酸分泌异常引发的消化性溃疡长期困扰人类健康，而组胺H₂受体（H₂R）作为关键靶点，其抑制剂的开发始终面临筛选效率低、作用机制不明确等挑战。传统中药甘草在胃肠疾病治疗中历史悠久，但其中与H₂R结合的活性成分及作用机制尚未系统阐明。

研究方法
北京同仁堂中药研究所（根据采购药材来源推断）的研究团队创新性地将重组表达的H₂R固定于色谱柱，建立受体亲和色谱模型。通过直接进样策略结合HPLC-IT-MS（高效液相色谱-离子阱质谱联用）鉴定活性成分，采用竞争置换实验和分子对接分析结合特性，并探究临床药物（nizatidine/ranitidine/famotidine）对甘草苷保留行为的调控机制。

关键技术

1. H₂R重组表达与固定化（BL21(DE3)诱导表达，HaloTag定向偶联）
2. 受体色谱柱的动力学相互作用分析
3. 竞争性结合色谱行为解析（保留时间偏移现象）
4. 分子对接模拟（Discovery Studio软件）

研究结果
Immobilization and characterization of H₂R
SDS-PAGE证实成功表达分子量约53 kDa的H₂R-Halo融合蛋白，固定化效率达82.3%，色谱柱载量达1.86 nmol/mL。

Discussion
发现甘草苷与H₂R的结合具有浓度依赖性，其保留时间随famotidine浓度增加呈现反常后移。分子对接显示：

• Nizatidine/ranitidine通过直接竞争ASP98/ASP186结合位点削弱甘草苷结合
• Famotidine通过盐桥重组受体表面电荷分布，间接改变甘草苷静电相互作用

CONCLUSIONS
该研究首次证实甘草苷可作为H₂R新型配体，其结合模式不同于经典药物：famotidine通过β-arrestin通路调控受体内化，而甘草苷可能通过变构效应发挥作用。建立的受体色谱模型为中药多组分筛选提供了高效平台。

意义
不仅为甘草抗溃疡药效物质基础研究提供新证据，更开创性地揭示了H₂R配体-受体相互作用的动态调控机制，为靶向药物设计提供了新思路。论文发表于《Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis》，标志着受体色谱技术在中药现代化研究中的突破性应用。