牛蜱Rhipicephalus microplus voraxin-α的B细胞表位通过免疫接种降低蜱虫生物适应性研究

本研究针对热带地区牛蜱Rhipicephalus microplus危害畜牧业的问题，通过鉴定voraxin-α蛋白中4个含B细胞表位的多肽，发现其中2个多肽（肽3和肽4）能诱导牛产生特异性抗体，使蜱虫存活率降低17%、产卵量减少14-18%、卵孵化率下降18-22%，为开发新型抗蜱疫苗提供了重要靶点。

　　

在热带和亚热带地区，牛蜱Rhipicephalus microplus是困扰畜牧业的重要害虫，不仅导致肉类和牛奶产量下降、皮革损伤，还是巴贝斯虫病和无形体病的传播媒介。长期以来，化学杀螨剂的广泛使用导致耐药性增强和环境问题日益严重。虽然已有商业化的抗蜱疫苗，但存在抗原变异、疫苗效力不足等问题，亟需开发新的疫苗靶点。

墨西哥国立自治大学生物技术研究所的研究人员将目光投向了一种名为voraxin的蜱虫生殖相关蛋白。这种主要由睾丸产生的蛋白质在交配时从雄性转移到雌性体内，对刺激雌蜱吸血和器官发育至关重要。研究团队从R. microplus中鉴定出voraxin-α基因，设计并合成了4个含预测B细胞表位的多肽，通过免疫牛群并人工感染10,000只幼虫，系统评估了这些表位对蜱虫生物学参数的影响。

研究采用基因扩增测序、生物信息学预测、间接ELISA和免疫组化等关键技术方法。从5个不同地理株系的R. microplus中扩增voraxin-α基因，使用4种软件预测B细胞表位，选择4个保守区域合成多肽。用含佐剂的多肽免疫无蜱区的牛，通过ELISA检测抗体水平，最后用免疫组化验证抗体对天然蛋白的识别。

在分子特征分析中，研究人员发现墨西哥四个地区的voraxin-α序列完全一致，与美国得克萨斯株有96.73%的相似性。系统发育分析显示R. microplus的voraxin-α与其他蜱物种的voraxin具有共同祖先。通过四种预测软件筛选出的四个多肽中，肽3（FPSLCVAAFHAELDTVDGEACP）和肽4（VDGEACPQSEQYARLL）能诱导持续性的抗体反应。

免疫效果评估显示，肽3使蜱虫存活率降低17.5%，产卵量减少13.8%，卵孵化率下降22.1%；肽4则使产卵量和卵孵化率均降低约18%。值得注意的是，与之前研究不同，蜱虫最终吸血重量未受影响，反而增加了6%。免疫组化证实抗体能识别蜱虫中肠和卵巢中的天然蛋白，这与voraxin参与生殖调控的功能一致。

讨论部分指出，这是首次将voraxin作为抗R. microplus疫苗靶点的研究。虽然未观察到预期的体重减轻效应，但对蜱虫存活、产卵和孵化的显著影响，证实voraxin-α的B细胞表位能有效降低蜱虫生物适应性。研究人员建议未来应寻找并纳入voraxin的β因子，构建多抗原疫苗。该研究为开发新一代抗蜱疫苗提供了重要理论基础，对减少化学杀螨剂使用、实现蜱虫综合管理(ITM)具有重要意义。

论文发表在《Ticks and Tick-borne Diseases》期刊，研究获得墨西哥国家科学技术委员会(CONACyT)、美国农业部农业研究局(USDA-ARS)等机构的资助。这些发现为开发针对蜱虫生殖系统的疫苗开辟了新途径，有望成为综合蜱虫管理方案中的重要组成部分。