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高效荧光检测法测定血浆中混合生育三烯酚的简便、灵敏且可重复的HPLC方法
【字体: 大 中 小 】 时间:2025年07月11日 来源:Journal of Chromatographic Science 1.5
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研究人员开发了一种简便、灵敏且可重复的高效液相色谱(HPLC)荧光检测法,用于同时定量人血浆中的混合生育三烯酚(α-、γ-和δ-)。该方法通过乙腈-四氢呋喃(3:2, v/v)去蛋白化处理样本,采用甲醇流动相(1.5 mL/min)分离,荧光检测波长296 nm/330 nm。结果显示线性范围优异(α-型12.7 ng/mL-2.54 μg/mL,γ-型19.2 ng/mL-3.84 μg/mL,δ-型4.6 ng/mL-0.923 μg/mL),回收率85.0%-111.2%,日内/日间精密度RSD<15%。该方法为药代动力学和生物利用度研究提供了可靠分析工具。
科研团队成功建立了一套创新性的高效液相色谱(High Performance Liquid Chromatography, HPLC)分析方案,专门用于检测人体血浆中三种关键生育三烯酚(tocotrienol)异构体。该方法巧妙地采用乙腈(acetonitrile)与四氢呋喃(tetrahydrofuran)的混合溶剂(体积比3:2)进行样本前处理,通过荧光检测器(激发波长296 nm,发射波长330 nm)实现高灵敏度检测。
色谱分离过程使用甲醇(methanol)作为流动相,流速精准控制在1.5 mL/min。方法验证显示,α-生育三烯酚的检测下限达12.7 ng/mL,γ-型和δ-型则分别为19.2 ng/mL和4.6 ng/mL。令人振奋的是,所有分析物的回收率均保持在85.0%-111.2%的理想范围内,且精密度测试中相对标准偏差(RSD)始终低于15%。
该方法特别适用于考察药物在体内的动态变化(药代动力学,pharmacokinetics)和吸收利用程度(生物利用度,bioavailability),为营养补充剂和药物研发提供了强有力的分析技术支持。经过反复冻融循环和长期储存稳定性测试,证实该方法具有出色的重现性和可靠性,完全满足临床前研究和临床试验的严格要求。
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