多地域采集的 Terminalia Arjuna 树皮中三萜类化合物的高效液相色谱分析与地理变异研究

本研究通过高效液相色谱（HPLC）结合多元统计分析，首次建立了同时定量 Terminalia arjuna 树皮中阿江榄仁酸（arjunic acid）和阿江榄仁苷元（arjungenin）的标准化方法，揭示了16个地理种群间三萜类成分的显著差异。研究创新性地采用主成分分析（PCA）、层次聚类（HCA）和热图可视化技术，鉴定出比杰诺尔阿曼加老虎保护区和戈勒克布尔森林区为高含量种群（P<0.05），为药用植物资源保护和标准化生产提供了关键数据支撑。

　　

Abstract
Terminalia arjuna 作为印度传统医学阿育吠陀中的明星物种，其树皮富含具有心血管保护作用的三萜类化合物。本研究创新性地对来自印度北部16个地理区域的275份样本展开系统分析，通过优化色谱条件（C18柱，乙腈-磷酸盐缓冲液梯度洗脱），建立同时检测阿江榄仁酸（保留时间28.880分钟）和阿江榄仁苷元（15.332分钟）的HPLC-PDA方法，验证显示线性良好（R²>0.987），检测限达0.014-0.043 μg/mL。

Introduction
该树种高达20-30米，在阿育吠陀中被称为"天然心脏补品"。现代研究证实其含有多酚（如没食子酸）和特征性三萜（阿江榄仁酸、阿江榄仁苷元等），但缺乏标准化的质量控制方法。环境因素导致的化学成分变异亟待系统评估。

Materials and methods
样本经40℃干燥后，采用超声辅助甲醇提取。总单宁含量（TTC）通过Folin-Ciocalteu法测定。色谱分析采用Waters系统，流动相A（pH2.8磷酸盐缓冲液）与B（乙腈）梯度洗脱（0.4 mL/min，205 nm检测）。闪式色谱分离阿江榄仁酸后，通过¹H-NMR（δ 0.80-5.60 ppm）和¹³C-NMR（δ 28-150 ppm）进行结构确证。

Results
提取物得率差异显著（8.43-19.86%），拉利特普尔森林样本单宁含量最高（31.09 mg/g）。阿江榄仁酸和阿江榄仁苷元在阿曼加保护区含量最高（6.99 mg/g），比城市样本高2.3倍（P<0.05）。PCA和HCA分析证实地理种群可分三类，热图直观显示北部保护区样本呈显著红色高值区。

Discussion
森林保护区样本的优越性可能与原始生境有关，而城市样本（德里、古尔冈）的低含量提示环境污染的负面影响。闪式色谱分离获得阿江榄仁酸（产率0.17%），其¹³C-NMR在δ 73-85 ppm出现特征性羟基碳信号，验证了分析方法的准确性。

Conclusion
本研究建立的HPLC方法为 Terminalia arjuna 质量控制提供了金标准，发现的"化学型-地理"关联性为优质种源筛选提供了科学依据。未来可结合转录组学深入解析环境因素对三萜生物合成途径（如MVA通路）的调控机制。